利用徒手切片技術(shù)來(lái)制備和觀察雙子葉植物葉片的顯微結(jié)構(gòu)

1.材料的選取

• 披針形的夾竹桃葉片和橢圓形的榕樹葉片

夾竹桃是觀察旱生植物葉片結(jié)構(gòu)的代表， 但需注意其有毒！

• 選成熟定型的老葉片

why：內(nèi)部結(jié)構(gòu)組成穩(wěn)定、清晰，也比較好切。

2.切片部位的選取

取葉片長(zhǎng)軸的中段偏靠葉基的區(qū)域，要“過(guò)中脈留兩翼”——選中脈以及中脈左右兩側(cè)的葉肉。

why：為了觀察到植物葉片的三種基本結(jié)構(gòu)：表皮、葉肉、葉脈

3.切片取材部位的大小

長(zhǎng)度2-3cm，“過(guò)中脈留兩翼”的整體寬度約0.5cm。

4.切片過(guò)程示范

①用雙面刀片（up用的是首馬牌 ，TB同款已下架）切取夾竹桃葉片長(zhǎng)軸中段偏靠基部部位

②切掉中脈左右兩側(cè)多余的葉片，僅留取中脈左右兩翼，使中脈及兩翼的整體寬度約為0.5cm

榕樹葉片跟夾竹桃葉片的切法一樣，略。

③將切好的材料握在手上。

用手拿材料時(shí)，

• 材料的近軸面（即上表皮）要緊靠食指的第一指節(jié)。
• 材料的切面要與食指第一指節(jié)的皮膚相平或略低0.1mm（切勿：材料的切面高于食指第一指節(jié)皮膚）。
• 夾持材料的拇指應(yīng)低于材料切面約0.3mm，且拇指絕不能屈指。

why：中脈左右兩翼的葉片往往會(huì)微微向葉片近軸面上翹。

④將刀片和材料用水潤(rùn)濕

⑤切片核心過(guò)程

刀片架在食指第一指節(jié)皮膚上，調(diào)節(jié)刀鋒與材料切面相平于同一水平線

切片時(shí)手腕不動(dòng)，手臂帶動(dòng)刀片進(jìn)行拉切，拉切方向是從左上角到右下角。

反復(fù)多切幾片。膽大心細(xì)，姿勢(shì)到位，一氣呵成。

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提示：

• 徒手切片初學(xué)者，起初切速不要過(guò)快，先要練習(xí)、掌握刀片的持法和切法。熟練后，再提速！
• 快速能避免、減少切片厚薄不均的情況
• 操作者跟觀看者感受是不一樣的。只要操作標(biāo)準(zhǔn)，一切安全都在操作者的掌控之中，沒(méi)有觀看者認(rèn)為的那么危險(xiǎn)。

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⑥將切下來(lái)的切片抖落在培養(yǎng)皿里的水中。

⑦用毛筆輕輕的將材料撈起，轉(zhuǎn)移至事先準(zhǔn)備好的載玻片上的水滴中，再蓋上蓋玻片制成臨時(shí)裝片

⑧進(jìn)行鏡檢觀察

⑨榕樹葉片橫切面的顯微鏡觀察結(jié)果

夾竹桃葉片橫切的顯微觀察在后期視頻

評(píng)論區(qū)Q&A總結(jié)：

Q：煙草類柔軟而且薄的葉片如何切呢，每次切都會(huì)變形，只能墊桌子上？

A：紙質(zhì)葉片很難切，可卷成一個(gè)圓柱再切

Q；小麥玉米等顆粒固體物的切片需要怎么制作

A：胚乳不好切，如果切實(shí)需要還得石蠟切片法比較靠譜，也可蓖麻種子胚乳細(xì)胞的切片方法（參見(jiàn)往期視頻）

Q：沉水植物等軟的葉子怎么切

A1：用夾持物，比如胡蘿卜，土豆，但是效果不佳，最好用的是:南方用鳳眼蓮的葉柄，北方用通草。

A2：或者瓊脂糖包埋。4%低熔點(diǎn)瓊脂糖。 ——太軟，易碎？

Q：切了一小時(shí)葉表面扒不下來(lái)？

A：葉片表面用刀片刮

Q：切過(guò)番茄果實(shí)切片嗎

A：沒(méi)切過(guò)，不過(guò)做過(guò)番茄離散細(xì)胞，很經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，往期視頻里面有