在 PBS 中制作 4% 甲醛溶液(材料、步驟)
2022-10-19 10:49 作者:biofount科研試劑 | 我要投稿
絕大多數(shù) IHC/ICC 程序使用基于甲醛的固定劑固定組織和細(xì)胞。 下面的協(xié)議描述了在 PBS 中生成 4% 甲醛溶液的技術(shù)。
注意:甲醛是有毒的。 在使用之前,請(qǐng)仔細(xì)閱讀 MSDS。 應(yīng)戴手套和安全眼鏡,并在通風(fēng)櫥內(nèi)配制溶液。
所需試劑
去離子水
鹽酸(稀釋)
氫氧化鈉 (1 N)
多聚甲醛粉
1X PBS:0.145 M NaCl、0.0027 M KCl、0.0081 M Na2HPO4、0.0015 M KH2PO4,pH 7.4
材料
過濾器單元
玻璃器皿和攪拌棒(甲醛溶液專用)
手套和眼睛保護(hù)
帶磁力攪拌器的熱板
溫度計(jì)
通風(fēng)罩
步驟
對(duì)于 1 L 的 4% 甲醛,將 800 mL 的 1X PBS 添加到通風(fēng)罩中攪拌板上的玻璃燒杯中。 邊攪拌邊加熱至約 60 °C。 注意溶液不要沸騰。
在加熱的 PBS 溶液中加入 40 克多聚甲醛粉末。
粉末不會(huì)立即溶解到溶液中。 通過從移液器中逐滴添加 1 N NaOH 來緩慢提高 pH 值,直到溶液變清。
一旦多聚甲醛溶解,應(yīng)將溶液冷卻并過濾。
使用 1X PBS 將溶液的體積調(diào)整到 1 L。
重新檢查 pH 值,并用少量稀 HCl 將其調(diào)整到大約 6.9。
該溶液可分裝并冷凍或在 2-8 °C 下保存長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月。
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