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Kamiya丨Kamiya艾美捷馬CRP ELISA說明書

2022-11-29 16:29 作者:艾美捷  | 我要投稿

Kamiya艾美捷馬CRP ELISA預期用途:

馬CRP ELISA是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫分析(ELISA)馬生物樣品中C-反應蛋白(CRP)的測定。僅供研究使用。

引言

急性期蛋白質(zhì)是血漿蛋白質(zhì),其在感染,炎癥或創(chuàng)傷后濃度增加。Tillet和Frances于1930年在人類中發(fā)現(xiàn)了第一個被識別的急性期蛋白。這種C反應性蛋白質(zhì)(CRP)之所以如此命名,是因為它能夠影響鏈球菌體細胞C-多糖的沉淀肺炎。CRP是一種α球蛋白,質(zhì)量為110000至140000道爾頓,由五個相同的α球蛋白組成亞基,它們非共價組裝成環(huán)狀五聚體。它在肝臟中合成,在人體中是通常以低于0.3mg/dL的水平作為血清的痕量成分存在。血清水平在隨后迅速上升急性組織損傷,一旦刺激被消除,也會迅速下降。有人提出CRP有助于補體激活,影響吞噬細胞功能,并增強細胞介導的細胞毒性。過去幾年的調(diào)查表明,血漿或血清中這些的定量可以提供有價值的不僅在人類中,而且在伴侶動物和農(nóng)場中檢測,預后和監(jiān)測疾病的信息牛群也是如此。

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Kamiya艾美捷馬CRP ELISA試驗原理:

在該測定中,CRP存在于樣品與吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗體反應。通過洗滌除去未結(jié)合的蛋白質(zhì)后,與辣根過氧化物酶(HRP)綴合的抗CRP抗體,被添加。這些酶標記的抗體與先前結(jié)合的CRP形成復合物。繼另一個洗滌步驟,通過添加顯色底物3,3',5,5'來測定與免疫吸附劑結(jié)合的酶-TMB。結(jié)合酶的數(shù)量隨樣品中CRP的濃度直接變化測試;因此,450nm處的吸光度是測試樣品中CRP濃度的量度。數(shù)量測試樣品中的CRP可以從校準器構(gòu)建的校準曲線內(nèi)插,并進行校正樣品稀釋。

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不穩(wěn)定的跡象:

如果測試執(zhí)行正確,校準解決方案觀察到的結(jié)果應在預期的20%以內(nèi)價值觀。

標本采集和處理:

應通過靜脈穿刺收集血液,并在凝塊形成后通過離心將血清與細胞分離。對于血漿樣本,應將血液收集到裝有抗凝血劑的容器中,然后離心。小心應該采取盡量減少溶血,過度溶血會影響你的結(jié)果。立即測定或等分并儲存樣品在-20°C。避免反復凍融。對于任何可能含有病原體的樣品,必須小心防止與開放性傷口接觸。

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Kamiya艾美捷馬CRP ELISA稀釋樣品:

由于測定的高靈敏度,每個樣品在用于正常測定之前應該稀釋。一個1:100血清或血漿的稀釋適用于大多數(shù)樣品。對產(chǎn)生結(jié)果的樣本進行絕對量化在校準曲線的范圍之外,可能需要更小或更大的稀釋。如果不確定樣本水平,a強烈建議在運行整個平板之前用一個或兩個代表性樣品進行連續(xù)稀釋。要制備1:100稀釋的樣品,請將5μL樣品轉(zhuǎn)移至495μL1X稀釋劑中。這給你一個1:100稀釋。徹底混勻。

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Kamiya基于免疫比濁技術的臨床診斷和研究免疫分析工具,用于脂質(zhì)評估、凝血、炎癥、糖尿病、營養(yǎng)評估和血清蛋白測量。艾美捷科技是Kamiya的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。


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