MICM分型：

1.Morphology形態(tài)學：

骨髓細胞形態(tài)學：準確觀察骨髓細胞

骨髓病理學檢查：疾病診斷依據

骨髓細胞化學染色：原位顯示細胞化學成分、酶活性。

2.Immunology免疫學

骨髓細胞免疫表型分析：流式細胞學分析表面抗原。

3.Cytogenetic細胞遺傳學

骨髓染色體分析：診斷分型、判斷預后

4.Molecular biology分子生物學

骨髓細胞分子生物學：診斷分型、判斷預后

【臨床應用】

1.診斷

1）血液系統

2）代謝疾?。焊曛x病(Gaucher)、尼曼匹克病(Niemann-Pick)

2.輔助診斷：骨髓轉移瘤、淋巴瘤骨髓浸潤

3.提高疾病診斷率：瘧原蟲、黑熱病、SLE

4.判斷療效、預后

【方法】

1.骨髓標本采集

1）骨髓穿刺術：

（1）穿刺部位：髂前上棘、髂后上棘、胸骨柄

（2）抽取骨髓液的量：0.2ml

（3）操作：涂片送檢，還可多取宋免疫、核型分析。

2）骨髓活檢術：活檢針取1cm骨髓組織病理檢查。

2.適應癥：

1）細胞：外周血細胞成分形態(tài)異常、出現原始幼稚細胞

2）體征：不明原因發(fā)熱、肝脾淋巴結腫大

3）癥狀：

（1）骨痛、骨質破壞、腎功能異常；

（2）黃疸、紫癜

（3）血沉增加、血漿蛋白異常、免疫球蛋白異常

4）療效：化療療效觀察

5）其他：骨髓活檢、造血祖細胞培養(yǎng)、染色體核型分析、微生物寄生蟲檢查。

3.禁忌癥：出血性疾?。ㄑ巡。?、晚期妊娠孕婦

【血細胞生成、發(fā)育規(guī)律】

1.起源：多能造血干細胞（自我更新、多向分化）

2.分化：

1）髓系干細胞

（1）EPO刺激：紅系祖細胞

（2）GM-CSF刺激：粒、單核系祖細胞：①原始粒細胞；②原始單核細胞

（3）嗜酸性粒祖細胞

（4）嗜堿性粒祖細胞

（5）Meg-CSF巨核細胞集落刺激因子刺激：巨核系祖細胞→原巨→幼巨→顆粒巨→產板巨→血小板（TPO刺激）

2）淋巴系干細胞

（1）T淋巴系祖細胞

（2）B淋巴系祖細胞

3.血細胞發(fā)育演變過程中的一般規(guī)律（先記大條：4大條，胞質有3小條，核有4小條，再記特點、差異）

1）體積、形態(tài)：大→小，圓形→不規(guī)則形（小、特異）

（1）巨核細胞：小→大

（2）早幼粒：大于原始粒細胞

2）胞質：多，酸，特異

（1）量：少→多（淋巴細胞變化不大）

（2）染色：深藍→淺藍→淡紅

（3）顆粒：無（原始）→嗜天青顆粒（早幼粒）→特異性顆粒（三性）

3）核：趨向凝集

（1）大?。捍蟆?，規(guī)則→不規(guī)則分葉（巨核細胞：小→大；紅系：失去核）

（2）染色質：細致疏松→粗糙致密，染色淺→深

（3）核仁：有→無，清晰→模糊→消失

（4）核膜：不明顯→明顯

4）核質比：大→??；巨核細胞相反。

【骨髓細胞形態(tài)學】

1.觀察內容：

1）肉眼觀察：選擇有骨髓小粒的涂片觀察

（1）多位于涂片尾部

（2）骨髓小粒缺如：混入了外周血，取材不良

（3）脂肪小滴增多：紅髓成分減少，骨髓增生降低

2）低倍鏡

（1）評估涂片質量

（2）估計有核細胞增生程度：

（3）計數巨核細胞：全片7-133個/片（低倍鏡無法確定巨核細胞發(fā)育階段）

（4）特殊細胞：轉移的癌細胞、戈謝細胞、尼曼皮克細胞

（5）瘧原蟲

3）油鏡

（1）涂片髓膜體尾交界處（紅細胞分散均勻，中央明亮，可以看的清立體結構）觀察200-500個細胞；計算各系細胞百分比、粒紅比

（2）觀察形態(tài)：粒系、紅系、單核系、淋巴系、其他

（3）確定巨核細胞發(fā)育階段

4）骨髓象分析報告：細胞特征、組化特征

2.檢查結果的臨床意義：

1）增生程度反映骨髓增生情況

2）骨髓中各系細胞和其各發(fā)育階段的比例

3）比例改變的臨床意義

（1）粒紅比

（2）粒系

（3）紅系

（4）淋巴系

（5）單核系

（6）漿細胞系

（7）巨細胞系

【骨髓病理學檢查】

1.取材：骨髓活檢術

2.方法：石蠟包埋、HE染色

3.臨床意義：反映骨髓造血狀態(tài)和纖維組織增生情況，協助診斷

【骨髓細胞組織化學染色】

1.常用細胞化學染色

1）髓過氧化物酶MPO

（1）原理：細胞MPO催化試劑聯苯胺氧化，與試劑中亞硝基鐵氰化鈉形成藍黑色顆粒，沉于細胞質。

（2）臨床意義：MPO存在于粒細胞、單核細胞。

2）非特異性酯酶NSE

（1）存在細胞：單核細胞

（2）原理：NSE酶活性可以被氟化鈉抑制，抑制后染色為陰性。

3）糖原染色PAS

（1）原理：過碘酸將糖原氧化為醛基，醛基于Schiff液中無色品紅結合，形成紫紅色化合物，在胞質。

（2）臨床意義：

4）鐵染色

（1）類別：

a.細胞外鐵：骨髓小粒中貯存在單核-巨噬細胞內的鐵（幼紅細胞之外的鐵）

※陽性反應：藍綠色沉淀

※陽性分級：(-)骨髓小粒無藍色；(+)少量鐵顆粒；(++)較多鐵顆粒；(+++)藍綠色小塊；(++++)極多小塊

b.細胞內鐵：幼紅細胞內的鐵（含有鐵顆粒的幼紅細胞為鐵粒幼紅細胞）

※鐵粒幼細胞百分率：油鏡下計數100個幼紅細胞中幼粒陽性的細胞數。

※環(huán)形鐵粒幼紅細胞：含藍綠色鐵粒5個以上，環(huán)繞細胞核排列半周以上。

（2）參考值

a.細胞外鐵：+~++

b.細胞內鐵：12-44%，且無環(huán)形鐵粒幼紅細胞。

（3）臨床意義：

5）中性粒細胞堿性磷酸酶NAP

（1）存在細胞：成熟中性粒、巨噬細胞

（2）陽性指標：胞質中出現顏色沉淀物，油鏡下觀察100個成熟中性粒細胞，陽性反應所占比率。

（3）參考值：成人陽性率10-40%；積分值40-80分（按照反應強度分級，加權得分）

（4）臨床意義：

a.感染：細菌↑，病毒↓

b.CML↓；類白血病反應↑

c.再障↑，陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥PNH↓

d. 真性紅細胞增多癥↑，繼發(fā)性紅細胞增多癥-

整理：

【骨髓細胞免疫表型分析】

1.方法：流式細胞術（單抗、免疫學技術對細胞膜特異性抗原進行檢測，分析細胞所屬系列）

2.意義：診斷血液系統疾病。

【細胞遺傳學分析】

1.染色體分析

1）方法：G顯帶

2）分析：染色體數目和結構

3）正常值：46,XX/46,XY

4）臨床意義：

（1）造血組織腫瘤診斷與分型

（2）MRD監(jiān)測：微小殘留白血病

（3）監(jiān)測遺傳學異常和血液病的發(fā)生

（4）骨髓移植后嵌合狀態(tài)檢測：若發(fā)現被移植者骨髓或血細胞被供者核型取代，題是完全嵌合，骨髓移植成功。

2.白細胞常見染色體易位及融合基因

【分子生物學檢測】

1.熒光原位雜交FISH

2.融合基因

參考：

1. 診斷學（第九版）-人民衛(wèi)生出版社
   

2. 實驗診斷學（第三版）-人民衛(wèi)生出版社