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DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes產(chǎn)品特性

2023-04-04 16:18 作者:bili_81003348773  | 我要投稿

1.簡(jiǎn)介

DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes是一組弱陰離子交換色譜填料。DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes專(zhuān)為生物分子的高分辨率純化而設(shè)計(jì),其中不純的成分很難通過(guò)普通的生物處理色譜填料分離。

DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes在配體密度、負(fù)載量和單個(gè)組分的分離能力之間進(jìn)行了平衡設(shè)計(jì),適用于大規(guī)模生物制造應(yīng)用。

DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes的基礎(chǔ)基質(zhì)由高度交聯(lián)的較小尺寸(20 - 50 μm)的瓊脂糖珠制成,具有出色的流動(dòng)性。它對(duì)生物加工行業(yè)中遇到的大多數(shù)化學(xué)條件都非常穩(wěn)定。

2.?產(chǎn)品特性

表1 ?DEAE SepFast HighRes的特性

*測(cè)試條件:10 ?mM緩沖液 pH ?7.5,上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì),停留時(shí)間5分鐘,50%穿透。


3.方法優(yōu)化

建議在載量、流速、結(jié)合pH值、結(jié)合離子強(qiáng)度、洗脫速度和梯度等參數(shù)之間進(jìn)行篩選。由于DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes的快速孔隙可及性,結(jié)合步驟可以在比洗脫步驟更快的流速下完成。建議特別注意優(yōu)化洗脫條件以獲得最佳分離能力。

強(qiáng)離子交換色譜填料可以在較寬的pH范圍內(nèi)保持其電荷(并因此保持其功能),而弱離子交換色譜填料的離解程度和離子交換容隨pH值而變化。因此,如果使用弱離子交換色譜填料,優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵。

通常在優(yōu)化方法時(shí),平衡組分分離度與工藝產(chǎn)量是主要考慮因素。此外,對(duì)于穩(wěn)定或對(duì)剪切敏感分子的純化,需要優(yōu)化操作條件以平衡產(chǎn)量和對(duì)目標(biāo)分子可能造成的損害。

4.裝柱

DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes由高度交聯(lián)的珠狀瓊脂糖制成,具有出色的機(jī)械強(qiáng)度。該色譜填料可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何類(lèi)型的色譜柱中。典型的包裝壓力高達(dá)3 bar。

5.保養(yǎng)

根據(jù)不同的應(yīng)用,色譜填料可能會(huì)被多次使用。如需重復(fù)使用,請(qǐng)參閱以下說(shuō)明。

(1)再生

每次運(yùn)行后,用高離子強(qiáng)度溶液(例如1M NaCl緩沖液)或增加pH?值。

(2)就地清洗??(CIP)

CIP是一種去除強(qiáng)結(jié)合物質(zhì)的程序,例如再生后殘留在吸附劑表面的脂質(zhì)、內(nèi)毒素和變性蛋白質(zhì)。定期?CIP?可防止污染物在填充床中積聚,并有助于保持色譜柱性能。

應(yīng)根據(jù)存在的污染物類(lèi)型為每個(gè)過(guò)程制定具體的?CIP程序。CIP?的頻率取決于各個(gè)應(yīng)用的性質(zhì)。

以下信息可作為一般指導(dǎo):濃度高達(dá)2 M的鹽可用于清除因離子相互作用而結(jié)合的雜質(zhì)。疏水性結(jié)合的污染物可以通過(guò)以下試劑去除:1?M?NaOH、低比例的非離子洗滌劑(例如0.1-2%)、堿性或酸性條件下的30%??異丙醇(例如在乙酸或磷酸存在下)。也可以探索上述試劑的組合。一般來(lái)說(shuō),孵育時(shí)間應(yīng)該更長(zhǎng)(例如從?30?min到2?h),以確保污染物完全解離。

(3)消毒

建議使用0.5?1.0?M?NaOH接觸1?h進(jìn)消毒。

6.儲(chǔ)存

DEAE 離子交換色譜填料SepFast HighRes應(yīng)儲(chǔ)存在20%乙醇中(強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜填料含有0.2?M?NaAC)以防止微生物生長(zhǎng)。將色譜填料存儲(chǔ)在4℃到30的溫度下。使用前,用至少5體積的運(yùn)緩沖液來(lái)平衡色譜填料。

7.更多信息

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8.訂購(gòu)信息


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