DNA損傷分析試劑盒，用于在體內(nèi)和體外測量8.8 kb線粒體DNA的損傷，通過QPCR分析，對復(fù)制的DNA進(jìn)行實時PCR定量：

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艾美捷Detroit R&D?DNA損傷分析試劑盒#DD2H、#DD2M、#DD2R 包含DNA聚合酶、QPCR引物和dNTPs，real-time PCR的引物，以及用于real-time PCR定量的8.8kb real-time PCR標(biāo)準(zhǔn)品(不包括SYBR Green master mix for real-time PCR)。重復(fù)分析20個樣品（45個反應(yīng)）。

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整套試劑盒可用于人、大鼠或小鼠的血液、細(xì)胞或組織。由于缺失和鏈斷裂造成的DNA損傷可以用此試劑盒檢測，使用微板格式的DNA分離技術(shù)，該試劑盒可以很容易地用于高通量格式。在這方面，Detroit R&D研發(fā)分析是一個很有前途的工具，因為快速，操作簡單，只需要少量的測試物質(zhì)。 ?

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DNA損傷分析試劑盒為基礎(chǔ)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了強大的工具。這種創(chuàng)新的方法是基于在一個長（8.2-8.8 kb）的線粒體DNA片段上進(jìn)行30個周期的定量PCR，然后使用實時PCR進(jìn)行定量。 ???

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左：實時PCR標(biāo)準(zhǔn)品擴增圖；右：實時PCR分析8.8kb線粒體DNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線

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候選藥物通常被生物轉(zhuǎn)化為有活性的毒性代謝物，通過COX-2過氧化物酶活性破壞DNA。Comet和OxyDNA檢測分別檢測斷裂DNA和氧化DNA。然而，候選藥物形成的數(shù)千種不同的DNAs，無法用這種方法檢測到。Detroit R&D開發(fā)了一種LQPCR檢測方法，用于檢測數(shù)千種不同候選藥物引起的DNA損傷修復(fù)缺陷，著色性干皮病A組（XPA）人成纖維細(xì)胞系致敏DNA損傷發(fā)生的候選藥物。表達(dá)COX-2的XPA細(xì)胞具有較強的COX-2催化活性。

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LQPCR DNA損傷檢測的應(yīng)用實例：

用一種已知的COX-2激活的DNA損傷劑benzo(a)pyrene-7,8-dihydrodiol (BPD)，COX-2過氧化物酶活性的底物- tert-butyl hydroperoxide (t-BOOH)處理表達(dá)COX-2的XPA細(xì)胞。采用LQPCR分析DNA損傷。如上圖柱狀圖所示，COX-2依賴性DNA損傷在BPD治療后顯著增加。 ??

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除了細(xì)胞系統(tǒng)外，LQPCR DNA損傷測定還可用于新鮮或冷凍的組織或血液標(biāo)本。因此，這種LQPCR DNA損傷試驗不僅可以用于篩選細(xì)胞內(nèi)的候選藥物，也可以用于篩選體內(nèi)的候選藥物。? ?