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DAPI溶液(介紹,溶液配制,使用步驟)

2022-10-10 09:07 作者:biofount科研試劑  | 我要投稿

DAPI 產(chǎn)品介紹:

DAPI (28718-90-3,DAPI Dihydrochloride)是一種熒光 DNA 染料,可與雙鏈 DNA 的小溝結(jié)合,優(yōu)先選擇富含腺嘌呤和胸腺嘧啶 (AT) 的 DNA。 DAPI 常用于顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)。 DAPI 可用于固定細(xì)胞或活細(xì)胞,盡管它在活細(xì)胞中的跨膜效率較低并且需要使用更高的濃度。采用DAPI配制 DAPI染色液:濃度為5 mg/ml,推薦工作濃度為0.5-10μg/ml。

DAPI溶解度

DMF溶液: 0.2 mg/ml

DMSO溶液: 3 mg/ml

Ethanol溶液: 0.2 mg/ml

DAPI溶液配制:

a.?取1mg的DAPI粉末,離心使粉末沉積在保存管底,后取1mL 的ddH2O將 DAPI粉末溶解,可以制備出 2.9mM的DAPI溶液(1mgDAPI/1mL H2O)。?備注: 不使用的制備液需要按照每次試驗(yàn)需求量分裝存儲(chǔ),以免反復(fù)凍融對(duì)試劑活性造成影響;DAPI 不可以用 PBS緩沖溶液或者其他緩沖液直接進(jìn)行溶解,需要先用水將其溶解。?
b.?取需要量的 DAPI溶液 加入 PBS緩沖液中,制得 10~50μM的 DAPI溶液。
※ 可選擇采用以下方法配制 PBS緩沖液: 稱取:8.00g NaCl,0.20g KCl,0.2g KH2PO4以及2.9g Na2HPO4·12H2O,溶于1L純水中制得。?

DAPI溶液使用步驟:

a. 量取 1/10培養(yǎng)基體積 的 DAPI溶液 加至細(xì)胞培養(yǎng)基里,當(dāng)然也可采取 1/10濃度 的 DAPI緩沖液 替代培養(yǎng)基。
b. 在37℃恒溫條件下,培養(yǎng)細(xì)胞約10~20分鐘,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)調(diào)節(jié)培養(yǎng)時(shí)間。
c. 之后再用 PBS緩沖液 或其他 適合的緩沖液 對(duì)細(xì)胞清洗2-3次。
d. 最后使用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察細(xì)胞,熒光顯微鏡需帶有 360nm激發(fā)波長(zhǎng)和460nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的。

DAPI溶液(介紹,溶液配制,使用步驟)的評(píng)論 (共 條)

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