原核生物轉(zhuǎn)錄的基本過程
原核生物轉(zhuǎn)錄的基本過程
*轉(zhuǎn)錄起始(initiation)
*轉(zhuǎn)錄延伸(elongation)
*轉(zhuǎn)錄終止(termination)
轉(zhuǎn)錄起始:
1. RNA聚合酶全酶識(shí)別并結(jié)合啟動(dòng)子,形成閉合轉(zhuǎn)錄復(fù)合體;其中DNA保持完整的雙鏈結(jié)構(gòu)。(原核生物需要靠RNA pol的s亞基辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始區(qū)和轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)。首先被辨認(rèn)的DNA區(qū)段是-35區(qū)TTGACA序列,在這一區(qū)段,酶與模板結(jié)合松弛,接著酶移向-10區(qū)TATAAT序列并跨過了轉(zhuǎn)錄起點(diǎn),形成與模板的穩(wěn)定結(jié)合。)
2. DNA雙鏈打開,形成開放轉(zhuǎn)錄復(fù)合體;DNA分子接近-10區(qū)域的部分雙螺旋解開后轉(zhuǎn)錄開始。DNA雙鏈解開的范圍只在17 bp左右,這比復(fù)制中形成的復(fù)制叉小得多。
?3. 在RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng),形成第一個(gè)磷酸二酯鍵:轉(zhuǎn)錄的起始不需要引物,兩個(gè)與模板配對(duì)的相鄰核苷酸,在RNA pol的催化下生磷酸二酯鍵。
*轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)配對(duì)生成的RNA的第一位核苷酸,也是新合成RNA分子的5'端,總是GTP或ATP,以GTP居多。
*當(dāng)5'-GTP與第二位的NTP聚合生成磷酸二酯鍵后,仍保留其3'端的游離羥基,可以接受新的NTP并與之聚合,使RNA鏈延長(zhǎng)下去。
轉(zhuǎn)錄延伸:
1.s亞基脫落,RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu),與模板結(jié)合松弛,沿著DNA模板前移;
2.在核心酶作用下,NTP不斷聚合,RNA鏈不斷延長(zhǎng);
3.轉(zhuǎn)錄延伸方向是沿DNA模板鏈的3′→5′方向,按堿基配對(duì)原則,生成5′→3′的RNA產(chǎn)物;
4. RNA鏈延伸時(shí),RNA pol繼續(xù)解開一段DNA雙鏈,長(zhǎng)度約17 bp,使模板鏈暴露出來,新合成的RNA鏈與模板形成RNA-DAN的雜交區(qū),新生的RNA鏈中只有8~9個(gè)核苷酸與模板結(jié)合,其余部分則從模板鏈上脫落下來;
5. 當(dāng)新生的RNA鏈離開模板DNA后,兩條DNA鏈重新形成雙股螺旋結(jié)構(gòu)。
轉(zhuǎn)錄終止:
指RNA聚合酶在DNA模板上停頓下來不再前進(jìn),轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來。?
*轉(zhuǎn)錄到終止位點(diǎn),不再形成磷酸二酯鍵
*RNA-DNA雜合鏈分開
*DNA雙鏈形成
*聚合酶及RNA單鏈釋放。