如何判斷您養(yǎng)的肺腺癌類器官是否正確？伯楨類器官應(yīng)用工程師為各位老師整理了標(biāo)準(zhǔn)化的肺腺癌類器官圖鑒，提供肺腺癌類器官生長全過程和鑒定結(jié)果，供老師們參考，快來查收吧~

本文所有類器官全部由伯楨肺腺癌類器官試劑盒（K2138-LA）培養(yǎng)。

肺腺癌類器官的生長過程

肺腺癌類器官原代培養(yǎng)

1例肺腺癌類器官原代（P0）培養(yǎng)生長過程示例：該例樣本初始分離獲得的腫瘤組織以單細胞為主。

在生長至第3天時，可觀察到明顯的3D細胞球；

繼續(xù)生長至第7天，這些細胞球直徑明顯增大且出現(xiàn)囊泡及致密型兩種形態(tài)，體現(xiàn)出腫瘤組織特征的異質(zhì)性；

在生長至第10天時，大部分腫瘤球出現(xiàn)明顯的空腔，直徑可達到200μm。

肺腺癌類器官傳代培養(yǎng)

1例肺腺癌類器官首次傳代后（P1代）生長過程示例:

經(jīng)消化的類器官在傳代培養(yǎng)起始時常為單細胞或不規(guī)則細胞團塊的狀態(tài)，這些單細胞或細胞團塊可在傳代后24小時形成新的3D細胞球克隆，繼續(xù)生長至第3天時直徑明顯增大，在生長至第5天時，可觀察到部分類器官有較大的空腔，類器官直徑約為50-70μm。

P5代肺腺癌類器官傳代至第五代，類器官背景更加純凈，在生長的第八天直徑明顯增大且出現(xiàn)囊泡及致密型兩種結(jié)構(gòu)，在生長至第十一天時，出現(xiàn)明顯的空腔，直徑達到100μm以上。

肺腺癌組織和類器官鑒定

肺腺癌組織和類器官HE染色

其中細胞核呈現(xiàn)藍紫色，細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)呈現(xiàn)紅色。HE染色顯示肺癌組織和類器官的組織內(nèi)細胞的細胞核、細胞質(zhì)顏色以及核質(zhì)比均近似，肺癌組織和類器官的細胞間排布紊亂伴隨腺腔結(jié)構(gòu)，提示類器官和來源組織在組織形態(tài)上相似。? ?

肺腺癌組織和類器官IHC鑒定

Ki67（細胞增殖的組化標(biāo)志物）免疫組織化學(xué)染色：

由Fig.A和Fig.B可見在肺腺癌組織中含有大量Ki67陽性細胞，肺腺癌類器官中央及空腔周圍細胞內(nèi)均有Ki67表達，提示腫瘤增殖程度較快。

TTF1免疫組織化學(xué)染色：

TTF1是肺腺癌的常見特異性標(biāo)志物，約在75%-85%的肺腺癌中表達。由Fig.C和Fig.D可見TTF1在腫瘤組織和類器官中細胞的細胞核中表達，提示腫瘤組織和對應(yīng)類器官在肺腺癌組化標(biāo)志物上的一致性。

肺腺癌組織和類器官的免疫熒光染色

TTF1和NapsinA是肺腺癌的常見特異性標(biāo)志物，TTF1約在75%-85%的肺腺癌中表達。

肺腺癌組織免疫熒光染色：Fig.A TTF-1、 Fig.B NapsinA、Fig.C Merge ?with DAPI；

對應(yīng)肺腺癌類器官免疫熒光染色：Fig.D TTF-1、 Fig.E NapsinA、 Fig.F Merge with DAPI。

比例尺：(50μm)

免疫熒光染色結(jié)果顯示類器官和來源組織均高表達TTF1和NapsinA，提示腫瘤類器官真實還原了來源肺腺癌組織的分子病理特征。

以上肺腺癌類器官全部由伯楨肺腺癌類器官試劑盒（K2138-LA））培養(yǎng)。

肺癌類器官論文集

伯楨類器官應(yīng)用工程師為大家統(tǒng)計了40篇發(fā)表的8分及以上肺癌類器官文獻，并選取一部分有代表性的文獻進行導(dǎo)讀。需要的老師可直接掃碼領(lǐng)取~

肺腺癌論文合集

肺癌是我國發(fā)病率及死亡率排名首位的惡性腫瘤，我國每年新增與死亡的肺癌患者均超過50萬。肺癌的組織學(xué)分類為非小細胞肺癌 (NSCLC，85%) 和小細胞肺癌(SCLC，15%) ，而NSCLC又可分為肺鱗癌(lung squamous-cell carcinoma， LSCC) 和肺腺癌(lung adenocarcinoma，LADC)兩種組織亞型。盡管肺癌治療取得了很大的進步，但是由于腫瘤的異質(zhì)性，臨床治療結(jié)果并不能令人滿。近幾年，隨著類器官技術(shù)的興起，類器官正逐步用于疾病建模、藥物篩選、機制研究、再生醫(yī)學(xué)等方面，這為腫瘤治療和研究提供了新的模型。

影響因子15分以上的文獻

1.肺腺癌類器官用于肺腺癌機制研究

文獻題目：PINK1-Mediated Mitophagy Promotes Oxidative Phosphorylation and Redox Homeostasis to Induce Drug-Tolerant Persister Cancer Cells[2].? ??

通訊作者：尹東

發(fā)表時間：2023.01.24

期刊名稱：Cancer Research?

影響因子：12.701

文章內(nèi)容：該研究發(fā)現(xiàn)肺腺癌( LUAD )細胞和類器官進入靜息的DTP狀態(tài)以存活MAPK抑制劑治療。抑制MAPK后的DTP細胞發(fā)生了從糖酵解到氧化磷酸化( OXPHOS )的代謝轉(zhuǎn)換。PTEN誘導(dǎo)激酶1 ( PINK1 )是啟動線粒體自噬的絲氨酸/蘇氨酸激酶，在DTP生成過程中被上調(diào)以維持線粒體穩(wěn)態(tài)。PINK1介導(dǎo)的線粒體自噬支持DTP細胞存活，并導(dǎo)致不良預(yù)后。機制上，MAPK通路抑制導(dǎo)致MYC依賴的PINK1轉(zhuǎn)錄上調(diào)，導(dǎo)致線粒體自噬激活。使用臨床適用的氯喹或敲除PINK1抑制線粒體自噬可以消除藥物耐受，并允許對MAPK抑制劑的完全反應(yīng)?？傊撗芯拷沂玖薖INK1介導(dǎo)的線粒體自噬作為DTP產(chǎn)生的一種新的腫瘤保護機制，為根除DTP和實現(xiàn)完全應(yīng)答提供了新的治療機會。

2.肺癌類器官用于高通量藥物篩選

文獻題目：Human Lung Adenocarcinoma-Derived Organoid Models for Drug Screening[3].

通訊作者：黃衛(wèi)人

發(fā)表時間：2020.07.25

期刊名稱：iScience

影響因子：4.447

文章內(nèi)容：肺癌是一種異質(zhì)性極強的疾病，其治療仍然是最具挑戰(zhàn)性的任務(wù)之一?，F(xiàn)有的實驗室肺癌模型很少能真實地概括疾病的多樣性和預(yù)測治療反應(yīng)。在這里，本文從最常見的肺癌亞型肺腺癌（LADC）建立了12種患者來源的類器官?；蚝徒M織病理學(xué)分析表明，腫瘤類器官保留了其親本腫瘤的組織學(xué)結(jié)構(gòu)、基因組景觀和基因表達譜?；颊邅碓吹姆伟╊惼鞴倏捎糜谏飿?biāo)志物鑒定和體外高通量藥物篩選。這項研究產(chǎn)生患者來源的肺癌類器官，可以用于進一步了解肺癌的病理生理和評估個性化治療中的藥物反應(yīng)。

3.晚期肺腺癌類器官用于臨床藥物治療

文獻題目：Modeling Clinical Responses to Targeted Therapies by Patient-Derived Organoids of Advanced Lung Adenocarcinoma[4]

通訊作者：Byoung Chul Cho

發(fā)表時間：2022.04

期刊名稱：Clinical Cancer Research

影響因子：10.107

文章內(nèi)容：本篇研究共建立了83個肺腺癌腫瘤類器官，成功率為83%，測序結(jié)果表明，肺腺癌類器官與原親本腫瘤組織學(xué)特性保持高度一致，晚期肺腺癌類器官可預(yù)測患者對TKI單藥治療的反應(yīng)研究結(jié)果表明類器官的體外藥物反應(yīng)與經(jīng)臨床治療的非小細胞肺癌驅(qū)動基因陽性患者的臨床結(jié)果相關(guān)，同時還比較了2D培養(yǎng)和3D培養(yǎng)類器官的臨床相關(guān)性，結(jié)果證實培養(yǎng)條件是類器官藥物敏感性的決定因素，在3D培養(yǎng)條件下的晚期肺腺癌類器官臨床相關(guān)性更好，本篇研究證實了類器官在晚期肺腺癌中轉(zhuǎn)化相關(guān)性，說明類器官作為一種重要的臨床診斷手段，能夠加速臨床藥物治療的進展。

4.肺癌類器官用于患者的個性化治療

文獻題目：Patient-derived lung cancer organoids as in vitro cancer models for therapeutic screening[5]

通訊作者：Se Jin Jang

發(fā)表時間：2019年

期刊名稱：Nature Communications

影響因子：14.919

文章內(nèi)容：肺癌表現(xiàn)出很大的遺傳和表型異質(zhì)性，導(dǎo)致臨床上需要針對個體患者使用個性化的藥物治療方案。本篇研究報告了從患者來源組織建立的肺癌類器官和正常肺支氣管類器官，包括肺癌和非腫瘤性支氣管粘膜等五個組織學(xué)亞型。結(jié)果表明肺癌類器官維持了原發(fā)腫瘤組織的組織形態(tài)學(xué)和基因遺傳學(xué)特征，并在體外長期擴張維持了原發(fā)腫瘤的基因組改變。正常支氣管類器官維持正常支氣管粘膜的細胞類型。肺癌類器官對藥物的反應(yīng)基于其基因組改變：BRCA2突變-p.M965I突變類器官對奧拉帕利敏感，BRCA2突變-p.W2619C突變類器官對奧拉帕利不敏感，EGFR突變體類器官對厄洛替尼敏感，以及EGFR突變-MET擴增類器官對環(huán)唑替尼敏感。本篇研究新開發(fā)的類器官模型有助于預(yù)測患者個性化藥物反應(yīng)。

5.肺腺癌類器官用于藥物機制研究

文獻題目：HER2 exon 20 insertions in non-small-cell lung cancer are sensitive to the irreversible pan-HER receptor tyrosine kinase inhibitor pyrotinib[6].

通訊作者：Hirsch, F R

發(fā)表時間：2019.03.01

期刊名稱：Annals?of?Oncology

影響因子：18.274

文章內(nèi)容：本篇研究從HER2陽性的晚期肺腺癌患者樣本中建立的患者來源的類器官和PDX模型，用于研究吡咯替尼的抗腫瘤活性，結(jié)果顯示，吡咯替尼在類器官和PDX都表現(xiàn)出了顯著抗癌活性，而且結(jié)果高度一致，與阿法替尼和T-DM1相比，吡咯替尼對HER2外顯子20突變的肺腺癌顯示出更好的治療療效。此外，臨床研究結(jié)果顯示患者對吡咯替尼具有較好的耐受性，并在每日一次400mg劑量的二期臨床研究中顯示出良好的療效。吡咯替尼在HER2外顯子20突變肺腺癌患者中表現(xiàn)出的顯著抗腫瘤活性。

6.非小細胞肺癌患者和PDX來源的類器官培養(yǎng)條件摸索

文獻題目：Organoid Cultures as Preclinical Models of Non-Small Cell Lung Cancer[7].

通訊作者：Tsao, Ming-Sound

發(fā)表時間：2020.04.01

期刊名稱：Clinical Cancer Research

影響因子：10.107

文章內(nèi)容：本篇研究將30例手術(shù)切除的原發(fā)性非小細胞肺癌患者組織和35例此前建立的患者來源的PDX模型用于建立類器官，培養(yǎng)成功率為88%。通過HE、IHC、流式和測序分析對類器官細胞進行組織學(xué)和分子生物學(xué)表征。通過在NOD/SCID小鼠皮下注射類器官來評估致瘤性。使用EGFR、FGFR和甲乙酮靶向療法對有機化合物進行藥物測試。本研究確定了兩種組織來源的非小細胞肺癌類器官短期和長期擴增的培養(yǎng)條件。同時，本研究證明了非小細胞肺癌類器官全面概括了患者腫瘤的基因組學(xué)和生物學(xué)特征，是一種進行藥物研究和生物標(biāo)志物評估的良好模型。

7.非小細胞肺癌類器官免疫共培養(yǎng)

文獻題目：Generation of Tumor-Reactive T Cells by Co-culture of Peripheral Blood Lymphocytes and Tumor Organoids[8].

通訊作者：Voest, Emile E

發(fā)表時間：2018.07

期刊名稱：Cell

影響因子：38.637

文章內(nèi)容：本篇研究通過患者來源腫瘤構(gòu)建的類器官和自身T細胞共同培養(yǎng)，建立一個研究腫瘤患者和自身T細胞相互作用的平臺，觀察誘導(dǎo)產(chǎn)生的腫瘤特異性T細胞對上皮癌的反應(yīng)，為分離評估腫瘤免疫中T細胞提供了新的方法，

本研究證明了對于錯配修復(fù)缺陷直腸癌和非小細胞肺癌患者，腫瘤類器官和免疫細胞的共培養(yǎng)可以誘導(dǎo)產(chǎn)生外周血中的腫瘤特異性T細胞；此外還評估體外誘導(dǎo)的T細胞介導(dǎo)對腫瘤細胞的殺傷效率。這一研究拓展了類器官在腫瘤免疫中的應(yīng)用，進一步推動了腫瘤免疫治療的發(fā)展。

總結(jié)：

1、肺癌類器官包括肺腺癌類器官、肺鱗癌類器官和小細胞肺癌類器官。

2、肺癌類器官能夠重現(xiàn)患者體內(nèi)腫瘤的組織病理學(xué)特性和遺傳學(xué)特征。

3、肺癌類器官可用于高通量藥物篩選、疾病機制研究和個性化治療等。

參考文獻

[1]Li,M. and J.C. Izpisua Belmonte, Organoids- Preclinical Models of Human Disease.N Engl J Med, 2019. 380(6):p. 569-579 .

[2]Rui Han, Yanting Liu, Shihua Li, Xiao-Jiang Li & Weili Yang (2022): PINK1- PRKN mediated mitophagy: differences between?in-vitro?and?in-vivo models,Autophagy,?DOI:10.1080/15548627.2022.2139080?.

[3]Li Z, Qian Y, Li W, Liu L, Yu L, Liu X, et al. . Human Lung Adenocarcinoma-Derived Organoid Models for Drug Screening. iScience (2020) 23(8):101411 .

[4]Kim SY., et al. Modeling Clinical Responsesto Targeted Therapies by Patient-Derived Organoids of Advanced LungAdenocarcinoma.?Clin Cancer Res. August, 2021 .

[5] Kim M, Mun H, Sung CO, Cho EJ, Jeon HJ, Chun SM, et al.?Patient-derived lung cancer organoids as in vitro cancer models for therapeutic screening. Nat Commun. 2019;10:3991.

[6]Wang, Y,Hirsch, F R,et al. HER2 exon 20 insertions in non-small-cell lung cancer are sensitive to the irreversible pan-HER receptor tyrosine kinase inhibitor pyrotinib.Ann Oncol.2019 Mar 1;30(3):447-455.

[7]Kim M., Mun H., Sung C, et al. Patient-derived lung cancer organoids as in vitro cancer models for therapeutic screening. Nat Commun., 2019, 10(1): 3991 .

[8] Dijkstra, K.K., et al., Generation of Tumor-Reactive T Cells by Co-culture of Peripheral Blood Lymphocytes and Tumor Organoids.?Cell, 2018. 174(6): p. 1586-1598.e12.

伯楨生物成立于2021年3月，2022年9月完成集團重組，總部立足蘇州工業(yè)園區(qū)。致力提供類器官標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品和一體化技術(shù)服務(wù)，覆蓋基礎(chǔ)研究、精準(zhǔn)醫(yī)療、藥物研發(fā)三大細分應(yīng)用場景。公司創(chuàng)始團隊深耕類器官行業(yè)底層技術(shù)創(chuàng)新，先后搭建全球首例人源類器官新冠感染模型、母細胞瘤發(fā)生模型等多疾病模型與新藥研發(fā)平臺，國際首臺首制類器官全自動建庫與高通量藥物發(fā)現(xiàn)平臺，及基于組織及腫瘤微環(huán)境解析的創(chuàng)新類器官模型構(gòu)建平臺。擁有覆蓋多譜系、多癌種類器官的全鏈條試劑、試劑盒產(chǎn)品，及全流程CDMO、CRO技術(shù)服務(wù)。伯楨生物秉承“引領(lǐng)醫(yī)藥創(chuàng)新，共享模型價值”的愿景，以國際一流的研發(fā)科技人才為核心，以“全球領(lǐng)先類器官模型平臺”為使命，堅持優(yōu)質(zhì)和高效的服務(wù)，切實提升客戶新藥研發(fā)效率和基礎(chǔ)研究能力，讓好藥更早惠及大眾。

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