蛋白磷酸化質(zhì)譜檢測
蛋白磷酸化質(zhì)譜檢測可以檢測蛋白磷酸化類型和位點等情況,可以用于磷酸化定量蛋白組學(xué)的研究。百泰派克生物科技提供磷酸化定量蛋白組學(xué)研究的服務(wù)。
蛋白磷酸化質(zhì)譜檢測
顧名思義,蛋白磷酸化質(zhì)譜檢測就是利用質(zhì)譜技術(shù)檢測蛋白質(zhì)的磷酸化。質(zhì)譜分析蛋白磷酸化包括:識別磷酸化多肽的存在,根據(jù)氨基酸序列確定磷酸化類型,確定磷酸化的位點,以及對磷酸化蛋白進行定量。由于磷酸化修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低、動態(tài)范圍廣,磷酸化肽段的信號容易被非磷酸化肽段的信號抑制,所以在利用質(zhì)譜技術(shù)分析樣品之前,需要先對磷酸化修飾的蛋白和肽段進行富集從而提高修飾蛋白的豐度。常用的富集磷酸化蛋白和肽的方法包括有固定金屬親和色譜以及高親和抗體免疫沉淀等。

蛋白磷酸化質(zhì)譜檢測原理
質(zhì)譜檢測蛋白質(zhì),首先是將蛋白質(zhì)酶解后的肽段離子化,因質(zhì)荷比不同,肽段在分析器中分離,通過測量分離肽段離子的相關(guān)參數(shù),再用軟件分析即可實現(xiàn)蛋白質(zhì)的檢測鑒定。磷酸化的蛋白肽段一般不穩(wěn)定,在質(zhì)譜中會因自發(fā)亞穩(wěn)態(tài)分解或者碰撞誘導(dǎo)裂解,在用磷酸酯酶處理后,磷酸化肽段易丟失一個HPO3或H3PO4分子,利用這些特征即可對磷酸化肽段進行鑒定。
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