鄭磊:植物囊泡樣納米顆粒研究與應用

課代表來啦
1.植物囊泡納米顆粒定義分類
定義:細胞外囊泡 分泌納米級囊泡結構 包含各種生物大分子
傳統(tǒng)認為 細胞外囊泡只是作為細胞排泄代謝廢物的工具 如今研究發(fā)現(xiàn)細胞外囊泡還具有其他功能?
大小分類:
exomeres
exosmes
enveloped virus
microvesicles...
植物囊泡:
1967年 發(fā)現(xiàn)胡蘿卜細胞的多囊泡體MVB 參與細胞壁附著物質分泌
2009年 獲取葵花籽植物囊泡
植物細胞基本結構
原生質體:
質外體:膜壁間 細胞壁 胞間隙 導管
植物囊泡分泌可能機制:
與
大分子組裝
調控機制
囊泡作用
有關
2.植物囊泡納米顆粒分離
植物囊泡獲取:
破壁法??
獲得植物衍生的納米囊泡
真空滲透-離心法(質外洗液):質外洗液 滲透液真空置換?
獲得細胞外囊泡
sEV方法得出的囊泡粒徑電位密度相較于破壁法低 脂膜厚度高
分離:
超高速離心+密度梯度離心(主流)
尺寸排阻+超濾
免疫親和
電泳透析
瓊脂電泳
3.植物囊泡納米顆粒表征
囊泡物理表征
形態(tài)學:TEM SEM AFM ...
粒徑:DLS NTA LTS
電位:DLS
濃度:NTA
蛋白濃度:BCA
囊泡生化表征
蛋白:蛋白免疫印跡
蛋白組學 尋找共同表達蛋白
現(xiàn)在需要開發(fā)植物囊泡顆粒通用型及種類特異性標志物
脂質:薄層液相譜
脂質組學 篩選特征性脂質成分
核酸:核酸電泳
植物RNA如何影響人類RNA等
代謝物:高效液相色譜-質譜
揭示植物EV未來的價值
4.植物囊泡納米顆粒應用
植物囊泡的基本生理功能
參與細胞壁形成與重構:
花菜囊泡 柑橘囊泡
跨物種交流如根植物-微生物相互作用媒介:
向日葵EV可被真菌內(nèi)化吸收抑制其生長
擬南芥EV抗真菌
參與植物代謝:
擬南芥EV參與植物免疫應答
植物囊泡的生物應用:
抗炎/抗腫瘤
抑菌/重塑腸道菌群
改善飲食誘導肥胖癥
藥物運輸載體
植物工程化囊泡
中草藥囊泡應用舉例:
黃漆木囊泡促進皮膚美白
中草藥湯劑來源的“湯劑體”
人參囊泡參與免疫調節(jié),重編程免疫微環(huán)境
...
5.中草藥囊泡研究和優(yōu)勢
優(yōu)勢:
免疫原性低 安全性高
可大批量 低成本生產(chǎn)制備
中草藥囊泡本身可能具有藥效作用
作為藥物運輸載體可產(chǎn)生協(xié)調治療效果
方向與挑戰(zhàn):
新型囊泡分離提純方法的開發(fā)比對和標準化;
廣譜性和特征性囊泡標志物的篩選及功能驗證
不同草藥衍生囊泡的體內(nèi)分布示蹤和代謝轉歸
根據(jù)草藥藥理特性選擇合適的生物應用場景