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艾美捷別藻藍(lán)蛋白普通儲(chǔ)備溶液制備&應(yīng)用介紹

2022-09-23 14:30 作者:艾美捷  | 我要投稿

藻膽蛋白由許多亞基組成,每個(gè)亞基具有蛋白質(zhì)骨架,線性四吡咯發(fā)色團(tuán)與之共價(jià)結(jié)合。藻紅蛋白(紅色)和藻藍(lán)蛋白(藍(lán)色)是兩種主要的藻膽蛋白。藻紅蛋白(PE)的吸收最大值介于?490?和?570 nm?之間,而藻藍(lán)蛋白(PC)的吸收最大值在?610?和?665 nm?之間。一般來說,藻膽蛋白在含有硫酸銨溶液中,冷藏儲(chǔ)存時(shí)具有良好的長期穩(wěn)定性。純化的藻膽蛋白在酸性或堿性條件下可能分解成亞基,但在室溫下,在中性溶液中,濃度大于?0.1 mg/mL?時(shí)相對(duì)穩(wěn)定。解離的亞基通常比天然色素具有較低的著色和熒光。建議所有藻膽蛋白及其結(jié)合物(最好是在中性緩沖溶液中)冷藏保存,不能冷凍。

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藻膽蛋白(包括?B-藻紅蛋白(B-PE),R-藻紅蛋白(R-PE)和別藻藍(lán)蛋白(APC))是用于生物檢測的超靈敏熒光染料。它們靈敏度比常規(guī)有機(jī)熒光團(tuán)高?100?倍以上,即使在流式細(xì)胞儀和免疫分析等實(shí)際應(yīng)用中也是如此。藻膽蛋白結(jié)合抗體的靈敏度通常遠(yuǎn)高于相應(yīng)的基于分子共軛物的有機(jī)抗體。

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別藻藍(lán)蛋白(APC)是從螺旋藻(一種藍(lán)綠藻)中分離的藻膽蛋白。與其他藻膽蛋白一樣,APC?是具有J高的吸收率和高量子效率的熒光物質(zhì)。它是一種蛋白質(zhì),通過常規(guī)蛋白質(zhì)交聯(lián)技術(shù)可以很容易地與抗體和其他蛋白質(zhì)連接,而不會(huì)改變其光譜特征。別藻藍(lán)蛋白在主要的藻膽蛋白中是最不穩(wěn)定的,在低濃度下(包括某些實(shí)驗(yàn)濃度)易于解離。CL-APC?是指α和β亞基化學(xué)交聯(lián)而形成的比?APC?更穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。交聯(lián)的別藻藍(lán)蛋白在水溶液中具有改善的穩(wěn)定性。

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艾美捷AAT-2554別藻藍(lán)蛋白普通儲(chǔ)備溶液制備:

表?1.將特定質(zhì)量的APC [別藻藍(lán)蛋白]重構(gòu)至給定濃度所需的水量。請(qǐng)注意,體積僅用于制備儲(chǔ)備溶液。有關(guān)適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)/生理緩沖液,請(qǐng)參閱示例實(shí)驗(yàn)協(xié)議。

0.1毫克?0.5毫克?1毫克?5毫克?10毫克

1毫米?952.381?毫升?4.762 μL?9.524 μL?47.619 μL?95.238 μL

5毫米?190.476?毫升?952.381?毫升?1.905 μL?9.524 μL?19.048 μL

10毫米?95.238?毫升?476.19?毫升?952.381?毫升?4.762 μL?9.524 μL

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光譜特性:

消光系數(shù)(cm -1 M -1)?700000

激發(fā)(納米)?651

發(fā)射(納米)?660

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艾美捷AAT-2554別藻藍(lán)蛋白圖片展示:

圖1.別藻藍(lán)蛋白?(APC)?是一種來自捕光藻膽蛋白家族的蛋白質(zhì),與藻藍(lán)蛋白、藻紅蛋白和藻紅藍(lán)蛋白一起。它是葉綠素的輔助色素。所有藻膽蛋白都是水溶性的,因此不能像類胡蘿卜素一樣存在于膜內(nèi),而是聚集形成粘附在膜上的簇,稱為藻膽體。別藻藍(lán)蛋白吸收和發(fā)射紅光,很容易在藍(lán)藻和紅藻中發(fā)現(xiàn)。藻膽素色素具有優(yōu)異的熒光特性,對(duì)于基于流式細(xì)胞術(shù)的免疫測定非常有用。

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艾美捷AAT別藻藍(lán)蛋白基本參數(shù):

編號(hào):2554

規(guī)格:1毫克/10毫克

分子量:105000

溶劑:水

H-短語:H303、H313、H333

危險(xiǎn)符號(hào):XN

有可能的使用:僅供研究使用?(RUO)

R-短語:R20、R21、R22

貯存:冷藏(2-8°C);盡量減少曝光

UNSPSC:12171501

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艾美捷AAT別藻藍(lán)蛋白參考文獻(xiàn):

Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging

Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.

Journal: Cytometry (2000): 226

Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon

Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.

Journal: FEBS Lett (2000): 9

Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay

Authors: Wu P., undefined

Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82


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