? ? ? ?今天是細(xì)小病毒的最后一章——鼠細(xì)小病毒(Minute Virus of Mice/Rodent Protoparvovirus 1/MVM)，它是第一個被發(fā)現(xiàn)的細(xì)小病毒，于20世紀(jì)60年代被發(fā)現(xiàn)。

簡介

? ? ? ?小鼠細(xì)小病毒(MVM)是嚙齒類原細(xì)小病毒1的典型病毒，屬于細(xì)小病毒科原細(xì)小病毒屬。MVM以多種變異形式存在，其中MVMp是感染成纖維細(xì)胞起源細(xì)胞的原型株，MVMi是免疫抑制株，感染T淋巴細(xì)胞。

? ? ? 對實驗室小鼠來說，MVM是一種常見的感染。由于其高度傳染性。病毒可通過受感染小鼠的糞便和尿液傳播，也可通過污染物和鼻腔分泌物傳播。一般來說，成年小鼠沒有感染的臨床癥狀，但是，實驗性感染會在胎兒發(fā)育期間或出生后不久造成多器官損傷。

病毒轉(zhuǎn)錄

? ? ? ? MVM在p4和p38上使用兩個轉(zhuǎn)錄啟動子和在p95上一個單一的多聚腺苷酸化位點來創(chuàng)建3個主要大小的mRNA，稱為R1、R2和R3，所有這些mRNA都有一個p46~p48之間的短內(nèi)含子序列被移除R1由p4產(chǎn)生，被轉(zhuǎn)譯為非結(jié)構(gòu)蛋白1(NS1)。然而，在一些P4轉(zhuǎn)錄本中，p10~p40之間的第二個內(nèi)含子也被切除，產(chǎn)生了編碼約25 kDa的NS2蛋白的R2 mRNA。它們與NS1共享85個n端氨基酸序列，然后剪接到一個交替的閱讀框中，最后到達短的中心內(nèi)含子，在這里可以加入2個不同的c端六肽。與轉(zhuǎn)錄本R1和R2使用的P4啟動子不同，R3轉(zhuǎn)錄本產(chǎn)生衣殼蛋白VP1和VP2，需要p38啟動子的轉(zhuǎn)錄。

DNA損傷反應(yīng)(DDR)

? ? ?? MVM在感染過程中誘導(dǎo)DNA損傷反應(yīng)(DDR)，這是有效復(fù)制的必要條件。ATM通路僅通過chk2介導(dǎo)的反應(yīng)被激活。目前尚不清楚是病毒蛋白或活躍的病毒復(fù)制激活了DDR，但UV滅活的MVM不會引起反應(yīng)，這表明僅MVM病毒粒子或MVM基因組的存在不能引起所觀察到的DDR激活。

MVM導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的機理

? ? ? MVM誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯的機制已經(jīng)部分闡明。在MVM感染期間，ns1介導(dǎo)APAR小體中參與病毒DNA復(fù)制的細(xì)胞因子募集導(dǎo)致細(xì)胞基因組復(fù)制關(guān)閉，隨后出現(xiàn)停滯的復(fù)制叉。因此，MVM誘導(dǎo)出一個細(xì)胞DDR，該DDR是在DNA損傷機制的復(fù)合物(如H2AX、Nbs1、RPA32、Chk2、p53和ATM)的APAR主體中招募的。這導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯，在MVM的情況下，發(fā)生在S/G2期，取決于細(xì)胞類型和實驗條件。雖然DDR的誘導(dǎo)需要病毒DNA和NS1蛋白，但NS2是不可缺少的，因為用缺乏NS2的MVM突變體感染A9細(xì)胞可以觸發(fā)對野生型(wt)病毒類似的DDR反應(yīng)。NS1的異位表達與DNA損傷標(biāo)志物yH2AX磷酸化水平升高相關(guān)，盡管水平遠(yuǎn)低于病毒感染細(xì)胞中觀察到的水平。NS1過表達也被證明可誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯，但其機制可能與整個病毒激活的不同，因為除了S和G2外，NS1過表達也發(fā)生在G1期。也有報道稱NS1的表達與單鏈DNA斷裂有關(guān)，導(dǎo)致細(xì)胞DNA復(fù)制的關(guān)閉。重新遷移到APAR體內(nèi)的DNA損傷機制的組件以其活性磷酸化的形式存在。共濟失調(diào)毛細(xì)血管擴張突變蛋白(ATM)是DNA損傷檢查點的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，是參與這些因子磷酸化的激酶，因為使用特定的ATM抑制劑可以減少磷酸化。重要的是，ATM介導(dǎo)的DDR信號通路既參與了MVM誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯的維持，也參與了病毒增殖的調(diào)控，因為抑制ATM活性會影響這兩個事件?？傊?，這些結(jié)果提供了證據(jù)，細(xì)胞周期阻滯是有效的病毒增殖所必需的。ATM信號在MVM誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯中的重要性進一步得到證實，在MVM感染的細(xì)胞中，ATM磷酸化的靶點Chk2介導(dǎo)CDC25A的蛋白體降解，CDC25A是細(xì)胞周期進展所需的一種磷酸酶。此外，MVM誘導(dǎo)的周期阻滯也以cyclin B1耗盡為特征，其方式依賴于DDR反應(yīng)通路。作為DDR誘導(dǎo)的結(jié)果，p53在MVM感染的小鼠細(xì)胞中也上調(diào)，并且很可能參與了觀察到的細(xì)胞周期阻滯。有趣的是，盡管p53被激活，但在MVM感染期間，p53的轉(zhuǎn)錄靶點——細(xì)胞周期蛋白激酶抑制劑(CKI) p21的蛋白水平仍然很低。病毒本身通過CRL4Cdt2 e3 -泛素連接酶誘導(dǎo)p21耗盡，也重新定位于MVM-APAR小體。PCNA是mvm復(fù)制所需的因子，作為p21/CRL4Ctd2 e3 -泛素連接酶相互作用和降解的支架蛋白。p21的降解對于有效的病毒復(fù)制是必要的，因為該蛋白會通過與PCNA和CDK-2相互作用和抑制而消極地干擾這一過程。這些結(jié)果表明，MVM能夠在多個層次上劫持DDR和細(xì)胞周期機制，重塑細(xì)胞環(huán)境，并將其重定向到更有效的復(fù)制。