來源：“Eppendorf實(shí)驗(yàn)室”公眾號
原標(biāo)題：讓懸浮細(xì)胞培養(yǎng)1+1>2的秘訣是……

當(dāng)我們在進(jìn)行重組蛋白表達(dá)或生物反應(yīng)器起始培養(yǎng)物（接種物）的生產(chǎn)時，哺乳動物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是非常重要的一環(huán)。

影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素非常多，為了優(yōu)化細(xì)胞生產(chǎn)條件，需要控制培養(yǎng)基的溫度和?pH 值，還需要持其體積，以避免代謝物、鈉離子等濃度的顯著變化而造成不利影響。

例如，哺乳動物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)大多需要在搖瓶中進(jìn)行，但是搖瓶在震蕩過程中，會增加培養(yǎng)基的蒸發(fā)，產(chǎn)生體積變化，所以尤其需要注意。

當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，搖瓶、搖床和培養(yǎng)箱都會對培養(yǎng)環(huán)境造成影響，所以優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境需貫穿始終。

適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件由具有高相對濕度（RH%）的富含?CO2?的氣體環(huán)境提供，這就需要有專門的設(shè)備來控制并維持。

今天小 編 就從一些容易忽視的細(xì)節(jié)出發(fā)，來聊一聊搖床對細(xì)胞培養(yǎng)條件會造成的影響。

01 搖床的散熱量

在 CO2?培養(yǎng)箱中使用搖床會給培養(yǎng)箱環(huán)境帶來額外的熱量。由于 CO2?培養(yǎng)箱是隔熱的，通常缺乏主動冷卻功能，這種額外的熱量可能會破壞 CO2?保溫箱的溫度控制。高于生理溫度僅 1℃ 的升溫會對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利影響。

02 搖床的重量和震動

如果?CO2?培養(yǎng)箱同時在培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，由于搖床的重量很容易超過擱板支架的負(fù)載（通常在 10 kg 的范圍內(nèi)），因此可能會發(fā)生擱板彎曲，從而導(dǎo)致培養(yǎng)皿/瓶的傾斜，貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)基條件就會發(fā)生差異。除此之外，搖床運(yùn)行造成的震動也會干擾箱內(nèi)其他細(xì)胞生長，如對震動敏感的細(xì)胞如干細(xì)胞或原代細(xì)胞。

03 搖床造成的污染隱患

預(yù)防污染對于避免細(xì)胞樣品損失、重復(fù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以及處理污染造成額外的成本顯得尤為重要。高溫消毒已成為 CO2?培養(yǎng)箱防污染的重要措施。因此，理想情況下，搖床應(yīng)在箱內(nèi)同時進(jìn)行高溫消毒（120–180°C）。

但目前市場上還沒有一款搖床能夠完全耐受高溫，所以在對?CO2?培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒之前，需要將其移除。當(dāng)重新放置搖床的時候，就會產(chǎn)生引入污染的風(fēng)險(xiǎn)。

在培養(yǎng)箱內(nèi)放置搖床不僅會對細(xì)胞培養(yǎng)條件產(chǎn)生影響，而且培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖、高濕（相對濕度約 95%）和微酸性的環(huán)境對搖床來說是一個嚴(yán)苛的工作環(huán)境，尤其是在腐蝕方面，這對搖床的使用壽命來說也是一個很大的考驗(yàn)。

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