常見的細(xì)胞核染料有Ethidium Homodimer-1（溴乙啡錠二聚體1）、hochest染料、DAPI、PI等。一起來看看這幾種染料的應(yīng)用吧~

1.Ethidium Homodimer-1 (EthD-1)，熒光顏色：紅色；染細(xì)胞類型：死細(xì)胞；應(yīng)用：

（1）Ethidium Homodimer-1是一種高親和性的熒光核酸染料，與DNA或RNA結(jié)合后，可以使熒光增強(qiáng)30多倍。

（2）由于帶有較強(qiáng)正電荷，所以該染料不能穿過細(xì)胞膜進(jìn)行活細(xì)胞染色，但是可以準(zhǔn)確的檢測(cè)溶液中的核酸或者解體細(xì)胞中的核酸，是一種較靈敏的核酸染色劑。

（3）此外EthD-1可與鈣黃綠素AM聯(lián)合使用，分別染色死細(xì)胞和活細(xì)胞，從而判斷細(xì)胞活力和毒性。

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2.Hoechst 33258&Hoechst 33342，熒光顏色：藍(lán)色；染細(xì)胞類型：活細(xì)胞(主要是早期調(diào)亡細(xì)胞)；應(yīng)用：

（1）Hoechst可以穿過活細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合(主要為凋亡活細(xì)胞)在紫外光下將核染為藍(lán)色，該染料在染細(xì)胞核時(shí)會(huì)影響共聚焦顯微鏡對(duì)該樣本其他熒光的觀察效果。

（2）Hoechst染料在細(xì)胞周期和凋亡（早期凋亡）研究中被廣泛應(yīng)用，也被廣泛應(yīng)用于核復(fù)染色，有Hoechst 33258和Hoechst 33342兩種。

（3）Hoechst 33258在活細(xì)胞中DNA的AT序列富集區(qū)域的小溝處與DNA結(jié)合，廣泛用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。兩者區(qū)別不大，但是Hoechst 33342對(duì)細(xì)胞的毒性作用更小一些，因此一般Hoechsts 33258用于細(xì)胞固定后再染色，而Hoechst 33342則可以對(duì)活細(xì)胞直接進(jìn)行染色。

除此之外，碘化丙啶（PropidiumIodide，PI）也是一種常見的細(xì)胞核染色染料，以下簡(jiǎn)稱“PI”。

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3.DAPI，熒光顏色：藍(lán)色；染細(xì)胞類型：活細(xì)胞和固定細(xì)胞；應(yīng)用：

（1）DAPI是一種常用的可以穿透細(xì)胞膜藍(lán)色熒光DNA染料，可對(duì)DNA?染色的細(xì)胞核染色試劑，其與DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI?自身強(qiáng)20多倍的熒光，而與單鏈DNA結(jié)合無熒光的增強(qiáng)。

（2）DAPI常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高于EB和PI,熒光強(qiáng)度比Hoechst低，但光穩(wěn)定性高于Hoechst。部分重垂，研究員可以替用這項(xiàng)特性在單-的樣品上進(jìn)行多重?zé)晒馊旧?/span>

（3）DAPI能快速進(jìn)入活細(xì)胞中與DNA結(jié)合，因此DAPI對(duì)生物體而言，也被視為-種毒性物質(zhì)與致癌物。使用過程中應(yīng)注意操作與拋棄的處理程序。

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使用PI單一染色觀測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞，只能表示細(xì)胞的壞死情況，而不是凋亡（當(dāng)然晚期凋亡PI亦可著色）。但是如果我們只是想知道細(xì)胞的死亡情況，而不是仔細(xì)區(qū)分壞死或凋亡，那么PI單一染色即可以。但是如果我們一定要認(rèn)定細(xì)胞的凋亡，那么PI單一染色顯然不夠！這個(gè)時(shí)候使用Abbkine的細(xì)胞狀態(tài)檢測(cè)系列產(chǎn)品，例如，TUNEL法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（細(xì)胞凋亡晚期），Annexin V/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒和線粒體膜電位分析試劑盒（JC-1）（細(xì)胞凋亡早期）以及Caspase系列活性分析試劑盒(比色法)（細(xì)胞凋亡中期）。

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文章來源：

染細(xì)胞嗎？核酸染料注意查收

http://www.abbkine.cn/nucleic-acid-dye

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