? ? ? ? 今天介紹的是馬立克病毒/(Marek's Disease Virus，MDV，Gallid Herpesvirus 2，GaHV-2)，它是在端粒整合的病毒，也是唯一具有整合在宿主細胞DNA上的甲型皰疹病毒。

簡介

? ? ? ? 馬立克病毒/雞皰疹病毒2(馬立克病毒/Marek's Disease Virus/MDV/Gallid Alphaherpesvirus 2/GaHV-2)是甲型皰疹病毒(Alphaherpesvirus)中馬立克病毒家族(Mardivirus)的一個病毒。雞、火雞和鵪鶉是自然宿主。與該病毒相關的疾病為馬立克氏病——一種導致一個或多個肢體不對稱癱瘓，神經(jīng)癥狀，發(fā)展為實體瘤的多發(fā)性淋巴瘤。

? ? ? ? 在馬立克病毒家族中，馬立克病毒/雞皰疹病毒2(馬立克病毒/Marek's Disease Virus/MDV/Gallid Alphaherpesvirus 2/GaHV-2)是唯一已知的致病性病毒，由于三種病毒之間的抗原相似性，其他兩種已被用于預防馬立克氏病的疫苗。

病毒結(jié)構(gòu)

? ? ? ? 馬立克病毒擁有包膜，具有二十面體T=16對稱。直徑約120-200納米，衣殼由162個衣殼組成。衣殼內(nèi)含有雙鏈線性DNA。

病毒基因組

? ? ? ? 馬立克病毒Md5毒株基因組長177874bp，含有44%的G-C堿基組成。馬立克病毒Md5毒株的組織方式與其他甲型皰疹病毒的組織方式相同。長唯一區(qū)域(UL)和短唯一區(qū)域(US)的長度分別為113563和10847 bp。每個唯一的區(qū)域都被相同的反向重復所限定。末端和內(nèi)部UL重復序列(TRL和IRL)分別為13065 bp，內(nèi)部和末端US重復序列(IRS和TRS)分別為12264 bp。與其他皰疹病毒一樣，重復區(qū)G-C含量高于獨特區(qū)(重復區(qū)為49 - 50%，獨特區(qū)為41 - 42%)。馬立克病毒Md5毒株不包含之前報道的在細胞培養(yǎng)傳代MDV1株的US/短重復區(qū)的逆轉(zhuǎn)錄病毒長末端重復序列。

? ? ? ?a序列位于基因組末端和馬立克病毒Md5毒株的IRL/IRS交界處。它們由7個與長末端重復序列相關的60 bp重復序列串聯(lián)副本、一個43 bp的獨特間隔序列和64個與短末端重復序列相關的6-bp重復序列串聯(lián)副本組成。馬立克病毒的6-bp重復序列與真核端粒中的重復序列相同，這就是為什么，馬立克病毒可以進行端粒整合的原因。

基因特征

? ? ? ? 馬立克病毒Md5毒株包含338個ORFs編碼蛋白，包含60個或更多的氨基酸，其中103個可能是功能基因。73個基因以單個副本的形式存在，并在獨特的區(qū)域內(nèi)啟動。30個基因開始并部分或完全位于重復區(qū)域內(nèi)，包括兩個基因在a序列區(qū)域內(nèi)。這里注釋了MDV004、MDV007、MDV075、MDV077、MDV086和MDV098的ORF，因為之前的報道指出這些ORF是蛋白質(zhì)編碼的。大多數(shù)馬立克病毒Md5毒株基因與其他mdv1菌株的已發(fā)表基因幾乎相同(99%的核苷酸和氨基酸特性)，而與MDV2(40 - 86%的氨基酸特性)的基因不太相似。在非禽皰疹病毒中，EHV1和EHV4通常與馬立克病毒Md5毒株最相似(25 - 61%的氨基酸特性)。

長重復區(qū)(UL)

? ? ? ?從核苷酸位置14029到127591的UL區(qū)域包含64個基因。MDV013~MDV070基因占馬立克病毒Md5毒株基因組的57%，與單純皰疹病毒1型(HSV-1)的UL1 ~ UL55基因共線性。這些馬立克病毒Md5毒株基因編碼的蛋白質(zhì)與HSV-1同源蛋白相同22 - 61%，與MDV2同源蛋白相同42 - 86%。在UL編碼的衣殼蛋白MDV030、MDV031和MDV048, DNA復制蛋白MDV017、MDV021、MDV042、MDV043、MDV055和MDV066，核蛋白MDV015和MDV044，糖蛋白MDV022、MDV040和MDV057與MDV2的同源蛋白高度保守(氨基酸同源性為66 ~ 86%)。被膜蛋白(MDV023、MDV033、MDV049、MDV059、MDV060和MDV062)和膜蛋白smdv032和MDV056保守性較差(氨基酸同源性為42 - 65%)。與MDV2同源物相比，病毒酶MDV025、MDV052、MDV055和MDV063含有顯著的插入和缺失。位于UL末端的MDV009、MDV010、MDV011、MDV012、MDV069和MDV072基因在HSV和馬皰疹病毒(EHV)等非禽皰疹病毒中不存在，提示這些基因可能在禽宿主范圍內(nèi)起作用。MDV010基因編碼一個684個氨基酸的蛋白質(zhì)，與其他病毒蛋白質(zhì)和已知的真核脂肪酶相似。MDV1菌株GA (MDV1 GA)的MDV010同源基因此前已被證明是剪接的。預測的蛋白包含在脂肪酶標記基序內(nèi)的絲氨酸活性位點和參與二硫鍵形成的保守半胱氨酸(氨基酸位置416和438)。氨基酸216和374之間的區(qū)域與真核脂肪酶如磷脂酶A1和三酰甘油脂肪酶相似。與MDV2和禽腺病毒預測蛋白的相似性超出了這一區(qū)域，表明存在病毒特異性結(jié)構(gòu)域。MDV010的氨基末端結(jié)構(gòu)域和540 - 553氨基酸位置的跨膜結(jié)構(gòu)域的存在表明MDV010可能是膜定位的。A1型磷脂酶已在許多哺乳動物組織(血小板、肝臟和心臟)中被鑒定為膜結(jié)合或胞質(zhì)酶，可催化轉(zhuǎn)酰化反應。磷脂酶A1對磷脂酸底物的活性可能會改變細胞內(nèi)第二信使途徑。在其他病毒感染中也觀察到宿主細胞第二信使途徑的改變。人類皰疹病8(卡波西肉瘤相關皰疹病毒)編碼的G蛋白偶聯(lián)受體與激活磷脂酶C均可刺激細胞增殖和轉(zhuǎn)化。巨細胞病毒和腺病毒都通過磷脂酶A2途徑影響花生四烯酸的代謝?；ㄉ南┧崾乔傲邢偎?、白三烯和脂質(zhì)體的前體，這些分子可以改變炎癥反應。在MDV感染期間，在體內(nèi)和細胞培養(yǎng)中都觀察到了脂質(zhì)代謝的改變。MDV01可能具有改變宿主脂質(zhì)代謝和修飾第二信使信號通路的宿主功能。

? ? ? ?與細胞轉(zhuǎn)化相關的三個基因的蛋白包括Marek’s EcoRI Q片段蛋白(MEQ)，它存在于兩個拷貝中(MDV005和MDV076)、pp38(MDV073)和pp24(MDV008)。MDV005和MDV076基因編碼339個氨基酸堿基區(qū)的亮氨酸拉鏈蛋白MEQ。MEQ是一個轉(zhuǎn)錄反式激活因子和潛在的癌蛋白。

? ? ? ?在MDV誘導的腫瘤細胞系中，MEQ已被證明誘導和維持轉(zhuǎn)化細胞表型,防止轉(zhuǎn)化細胞凋亡,與細胞周期蛋白依賴激酶2調(diào)節(jié)細胞周期變動。與MDV1 GA的MEQ相比，MDV005和MDV076在第2個完全富脯氨酸重復序列的217位丙氨酸、283位纈氨酸和320位蘇氨酸存在氨基酸置換。MDV004和MDV077基因是MEQ基因的反義基因和一個ORF的同源物，該ORF編碼一個23 kda的核蛋白，在MDV004轉(zhuǎn)化的淋巴母細胞中大量表達。

短重復區(qū)(US)

? ? ? US片段從153799位到164645位(10847 bp)，包含編碼MDV088到MDV097的9個基因，其中包括HSV-1的US1、US2、US3、US6、US7、US8和US10的同源基因。MDV1 GA US區(qū)域已經(jīng)完全測序(11160 bp)， MDV1 RB1B US區(qū)域已經(jīng)部分測序。馬立克病毒Md5毒株 ORF與幾乎相同(99%的核苷酸同源性)對這兩株MDV1的ORF。馬立克病毒Md5毒株包含在US/TRS邊界的序列(核苷酸位置164033到164518和164636到165464)，這些序列在MDV1 GA中是不存在的。由于TRS的擴展，馬立克病毒Md5毒株的US區(qū)域比MDV1 GA的US區(qū)域短313個核苷酸。正如以前報道的，MDV1US區(qū)基因的排列與其他甲型皰疹病毒不同。與HSV-1的US10基因相比，MDV089基因(US10基因同源物)是倒置易位的，與偽狂犬病毒(PRV)、馬皰疹病毒(EHV)和水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)相比，HSV-1的US10基因沒有同源物位于短重復區(qū)。

? ? ? ?MDV084和MDV100基因編碼HSV-1主要即刻早期轉(zhuǎn)活蛋白ICP4的同源物。這些蛋白質(zhì)包含2321個氨基酸，包含超過57%的短重復區(qū)域，與其他皰疹病毒的ICP4同源物相比，包含900個氨基酸的氨基末端延伸。在HVT和MDV1 GA中也存在一個類似大小的ICP4同源體。

? ? ? ? 馬立克病毒Md5編碼HSV-1中另外兩個直接早期蛋白的同源物：ICP27(MDV068)和ICP22 (MDV088)，前者對HSV-1的復制至關重要。Md5缺乏直接早期蛋白ICP0和ICP47的同源物，ICP0對細胞培養(yǎng)中HSV-1的復制不是必需的，ICP47是一種阻斷HSV-1抗原呈遞的宿主蛋白。在MDV1和MDV2中，US/短重復區(qū)是可變的。馬立克病毒Md5短重復序列與MDV1 Md11株和毒性較低的JM和Cu-2株相比的擴展已經(jīng)被限制性內(nèi)切酶分析發(fā)現(xiàn)。MDV087和MDV097基因跨US/短重復區(qū)。這兩個基因的產(chǎn)物有119個相同的氨基酸末端編碼在短重復區(qū)。MDV087以前在MDV1 GA中被描述為SORF2。與MDV087不同，SORF2完全在MDV1 GA的US區(qū)域內(nèi)編碼。MDV1 GA中沒有MDV097的同源基因。SORF2已被證明對細胞培養(yǎng)中MDV1的復制不是必需的，在非致病性MDV2中不存在。MDV087和MDV097與禽痘病毒和禽腺病毒的推測蛋白相似，表明這些蛋白具有禽宿主范圍的功能。因此，US/短重復區(qū)連接處的差異，包括與SORF2基因相似的第二基因(編碼MDV097)的存在，可能影響病毒的毒性，并有助于馬立克病毒Md5的增強毒性。MDV1中含有一個與ICP4同源物反義的延遲相關轉(zhuǎn)錄本(LATs)家族。雖然LATs在病毒潛伏期和細胞轉(zhuǎn)化中的作用尚不清楚，但MDV086和MDV098基因的同源基因編碼了來自該區(qū)域的蛋白質(zhì)。MDV083和MDV101基因也被標注為晚期基因。鑒于LAT轉(zhuǎn)錄本在該區(qū)域內(nèi)的復雜拼接，可能存在額外的蛋白質(zhì)編碼序列。

病毒生活周期

? ? ? ? 病毒在細胞核內(nèi)進行溶原性復制。進入宿主細胞是通過病毒gB、gC、gD和gH蛋白附著到宿主受體上，介導內(nèi)吞作用。復制遵循DNA雙向復制模型。DNA模板轉(zhuǎn)錄是一種具有選擇性剪接機制的轉(zhuǎn)錄方法。病毒通過細胞核出芽和細胞膜出芽離開宿主細胞。雞、火雞和鵪鶉是自然宿主。

馬立克氏病

? ? ? ? 馬立克氏病是一種由馬立克病毒/雞皰疹病毒2(馬立克病毒/Marek's Disease Virus/MDV/Gallid Alphaherpesvirus 2/GaHV-2)引發(fā)的高度傳染性的病毒腫瘤疾病，以喬茲塞夫·馬立克(Jozsef Marek)的名字命名。該疾病的特點是存在T細胞淋巴瘤，以及淋巴細胞浸潤神經(jīng)和器官。與MDV相關的病毒似乎是良性的，可以作為預防馬立克氏病的疫苗菌株。例如，在火雞皰疹病毒(HVT)中發(fā)現(xiàn)的相關皰疹病毒不會在鳥類中引起明顯的疾病，并繼續(xù)被用作預防馬立克氏病的疫苗菌株。 感染GaHV-2的鳥類可以是病毒的攜帶者和流落。新生雛鳥在幾周內(nèi)受到母體抗體的保護。感染后，一到兩周后出現(xiàn)顯微病變，三到四周后出現(xiàn)大病灶。 馬立克氏病從羽毛毛囊中傳播，并通過呼吸道感染。