【菜鳥博士】waters UPLC HPLC使用教程之五、儀器方法

2022-05-13 00:07 作者:菜鳥博士_雜貨鋪 0人讀過 | 我要投稿

五、儀器方法

1、在圖1所示的“儀器方法編輯器”界面上部列出色譜系統(tǒng)的配置，通過點(diǎn)擊不同的儀器模塊可對其進(jìn)行儀器方法編輯。儀器方法編輯主要是：分離模塊的方法編輯和檢測器的方法編輯。

圖 1

1、分離模塊的方法編輯主要包括：通用、脫氣、時(shí)間、流量、溫度、溶劑和通道。

在“通用”界面中可根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法要求的流速來設(shè)置“輸送體積”的大?。ㄈ鐖D2所示），例如流速為1.0ml/min時(shí)將“輸送體積”的大小設(shè)為50微升。

圖 2

也可根據(jù)不同的樣品性質(zhì)更改自動進(jìn)樣器的“注射器吸取速度”（如圖3所示）以及進(jìn)樣針“針頭的清洗時(shí)間”（如圖4所示）。注意：當(dāng)使用玻璃內(nèi)襯管時(shí)，需要將進(jìn)樣針的“針頭深度”進(jìn)行調(diào)整，此時(shí)需要將“針頭深度”調(diào)整為2（如圖4所示）。

正常：2.5ul/s

緩慢：1ul/s

快速：5ul/s

圖 3

正常：13 s

雙：26 s

延長：52 s

圖 4

如系統(tǒng)配備氦氣脫氣裝置，可在“脫氣”一欄的“噴射”中設(shè)置每一路溶劑的氦氣通入流量。如配備在線脫氣機(jī)可在“脫氣”中選擇“脫氣模式”為開或關(guān)如圖5所示。

圖 5

如下圖6所示，在“流量”界面可設(shè)置此方法運(yùn)行的“壓力限制”，超出此壓力范圍則系統(tǒng)會報(bào)錯停止運(yùn)行。在“設(shè)定的流量”一欄可選擇“泵模式”為“等度”（如圖6所示）或是“梯度”（如圖7所示），也可設(shè)定相應(yīng)的泵流速以及各相的比例等。在“泵模式”為“梯度”（如圖7所示）時(shí)，可設(shè)置某一時(shí)間段內(nèi)流動相梯度變化的曲線，具體的曲線模式如圖8所示。

圖 6

圖 7

圖 8

在如下圖9所示的“溫度”選項(xiàng)卡中勾選“柱溫”則可設(shè)置柱溫箱的設(shè)定溫度，“柱溫范圍”是指柱溫箱的溫度控制在目標(biāo)溫度上下浮動柱溫范圍之內(nèi)。如配備樣品盤控溫模塊亦可設(shè)置“樣品目標(biāo)溫度”。

圖 9

Empower在運(yùn)行樣品采集數(shù)據(jù)時(shí)也可設(shè)置其他“監(jiān)視的參數(shù)”，如“系統(tǒng)壓力”。一般而言，通過觀察色譜系統(tǒng)的系統(tǒng)壓力可以判斷樣品在運(yùn)行期間儀器狀態(tài)是否正常，因此可在方法編輯的時(shí)候勾選通道內(nèi)的“啟用通道”，在“監(jiān)視的參數(shù)”中選擇“系統(tǒng)壓力”，如下圖10所示。

圖 10

2、Waters 2489紫外/可見光檢測器的方法編輯

Waters 2489紫外/可見光檢測器的方法需要進(jìn)行編輯的主要有：波長模式、檢測波長、采樣速率以及檢測器事件等。

在如下圖11所示的2489紫外/可見光檢測器的方法選項(xiàng)卡中，可以選擇檢測器的“波長模式”、檢測波長以及此波長下的“采樣速率”。

圖 11

若檢測器的“波長模式”為“雙”波長模式，則可對“通道B”進(jìn)行設(shè)置如下圖12所示。

圖 12

也可在如下圖13所示的檢測器“事件”選項(xiàng)卡中進(jìn)行“運(yùn)行事件”的編輯，如不同時(shí)間段不同波長的程序等?！斑\(yùn)行事件”的編輯方法為在“時(shí)間”中輸入需要編輯事件的時(shí)間，在對應(yīng)的事件一欄選擇相應(yīng)的事件，在參數(shù)一欄輸入對應(yīng)此事件的參數(shù)。