圓二色譜分析蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)
蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)指的是肽鏈局部的空間結(jié)構(gòu),是由主鏈折疊產(chǎn)生的以氫鍵維系的有規(guī)則的、不對(duì)稱(chēng)的構(gòu)象,如α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無(wú)規(guī)則卷曲等,這些不對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)使蛋白質(zhì)分子具有圓二色性。圓二色譜(Circular Dichroism,CD),又稱(chēng)圓二色光譜,根據(jù)待測(cè)物的圓二色性分析其立體空間結(jié)構(gòu),是研究蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的有力工具。
圓二色譜分析蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的基本原理是蛋白質(zhì)對(duì)平面偏振光的左、右吸收系數(shù)不同,用平面偏振光照射蛋白質(zhì)溶液,蛋白質(zhì)對(duì)左、右圓偏振光的吸收系數(shù)存在差異,以這種左、右吸收系數(shù)差為縱坐標(biāo),平面偏振光的波長(zhǎng)為橫坐標(biāo),就可以得到該蛋白質(zhì)的圓二色譜圖。在此光譜曲線中,當(dāng)左偏振光吸收系數(shù)(εL)大于右偏振光吸收系數(shù)(>εR)時(shí), 左右偏振光的吸收系數(shù)之差Δε為正值,說(shuō)明該蛋白質(zhì)為右旋;反之,當(dāng)εL小于εR時(shí),則得到一個(gè)負(fù)的圓二色光譜曲線,即被測(cè)蛋白質(zhì)樣品為左旋。
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