腎上腺髓質(zhì)增生動物模型【疾病動物模型】

【造模機(jī)制】利舍平(利血平)可與腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞內(nèi)顆粒囊泡膜上胺泵呈難逆性結(jié)合,使胺類遞質(zhì)和多巴胺均不易被攝取,終使囊泡內(nèi)遞質(zhì)趨向耗竭,從而反射性地刺激與嗜鉻細(xì)胞以突觸形式相接觸的交感神經(jīng)節(jié)前纖維,使兒茶酚胺合成酶活性增強(qiáng),兒茶酚胺合成增加。由于要合成大量的兒茶酚胺,腎上腺髓質(zhì)首先出現(xiàn)適應(yīng)性肥大,繼而發(fā)生腎上腺髓質(zhì)增生(adrenal medullary hyperplasia,AMH)。

【造模方法】選用雄性 SD 大鼠,200～230g。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng) 1 周后,開始皮下注射1.0mg/(kg?d)利舍平,連續(xù)給藥4 周。給藥完畢后每天測量大鼠血壓;隔日以對硝基苯胺顯色法測定大鼠 24 小時尿中 3-甲氧 4-羥基苦杏仁酸(VMA)的含量,熒光法測定血漿兒茶酚胺(CA)水平;最后處死大鼠,取出腎上腺,置人 Regaud 氏液固定。切片用 Whiesel 氏嗜鉻細(xì)胞特殊染色,顯微鏡下用測微器分別測量髓質(zhì)和皮質(zhì)的切面厚度,計算髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)。髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)=髓質(zhì)切面厚度/皮質(zhì)切面厚度十髓質(zhì)切面厚度)×100%。

【模型特點】

1.模型大鼠 24 小時尿中 VMA 含量顯著增高血漿兒茶酚胺(CA)水平顯著升高,血壓未見增高。

2.模型大鼠病理檢查可見腎上腺皮質(zhì)相對較薄,髓質(zhì)相對增厚,多呈彌漫性增生未見結(jié)節(jié)狀增生,亦未見出血,壞死等病理性改變。髓質(zhì)細(xì)胞呈實質(zhì)性片狀或條索狀分布,可見因增生而形成的細(xì)胞巢,有時可見髓質(zhì)增生伸入皮質(zhì),將皮質(zhì)分割成島狀。髓質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Regaud 氏液固定后,細(xì)胞破裂而發(fā)生融合,可見染成淺綠色的細(xì)胞漿?？梢姶罅康募?xì)胞核。核圓,呈增生活躍狀態(tài)。在增生的髓質(zhì)細(xì)胞團(tuán)間可見構(gòu)成竇狀毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞,有時可見到交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。正常大鼠腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞無增生,細(xì)胞核少,未見髓質(zhì)細(xì)胞巢。

3.模型大鼠髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)顯著增高

【應(yīng)用范圍】本模型的建立為進(jìn)一步研究 AMH 提供了實驗基礎(chǔ),適用于人類 AMH 的發(fā)病機(jī)制、診斷、治療等相關(guān)研究。

【注意事項】人類正常腎上腺髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)為 11.1%左右,而 AMH 患者腎上腺髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)超過 16.7％,因而髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)是診斷 AMH 的重要指標(biāo)。但髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)不是唯一標(biāo)準(zhǔn),因為有些大鼠在腎上腺髓質(zhì)增生同時伴有皮質(zhì)增生,它們的髓質(zhì)百分?jǐn)?shù)并不增高,所以應(yīng)結(jié)合腎上腺髓質(zhì)病理改變綜合判斷才能確診 AMH。

【模型評估】本模型制備方法簡便,腎上腺髓質(zhì)增生程度大,陽性率高,長期穩(wěn)定性好。

本模型在生化檢查(VMA,CA?測定)和病理改變等方面與人類 AMH 有較大的相似性,但缺乏人類 AMH 常見的陣發(fā)性或持續(xù)性高血壓。

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