西尼羅病毒（West Nile Virus，WNV）可引起人畜共患、蟲(chóng)媒傳播的自然疫源性疾病，即西尼羅?。╓est Nile Disease，WND）,雖然名字聽(tīng)起來(lái)比較陌生，但是這并不是一種新發(fā)傳染病，只是大多數(shù)的感染者為隱性感染或低熱等非特異性癥狀。早在20世紀(jì)90年待，西尼羅病就爆發(fā)過(guò)，導(dǎo)致了人群大規(guī)模感染和高死亡率，并伴隨大量的鳥(niǎo)類、家禽、馬和牛等的死亡。雖然我國(guó)目前尚未出現(xiàn)人感染西尼羅病，但是未來(lái)仍然存在西尼羅病傳入和流行的風(fēng)險(xiǎn)，因此對(duì)西尼羅病毒的研究也有助于未來(lái)有效預(yù)測(cè)、預(yù)防和控制西尼羅病。

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西尼羅病毒是一種基因組約為11kb的單股正鏈RNA病毒。該病毒基因組5’端為結(jié)構(gòu)蛋白區(qū)，3’端為非編碼區(qū)。這種RNA可直接作為mRNA而翻譯成多肽，并在病毒和細(xì)胞內(nèi)蛋白酶的共同作用下被切割成3種結(jié)構(gòu)蛋白（衣殼蛋白C、胞膜蛋白E和膜蛋白prM/M）和7種非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1、NS2a、NS2b、NS3、NS4a、NS4b和NS5）。其中E蛋白在西尼羅病毒的生命周期中起著重要作用，也是產(chǎn)生中和抗體的主要病毒蛋白。由于E蛋白可以介導(dǎo)病毒附著以及病毒和宿主的融合，并且大多數(shù)中和抗體是針對(duì)E蛋白上的抗原表位產(chǎn)生的，因此E蛋白是目前西尼羅病毒疫苗開(kāi)發(fā)的最佳研究靶點(diǎn)。

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接下來(lái)一起看看艾美捷丨Cell Biolabs的?西尼羅病毒胞膜蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒，方便快捷，助力科研。

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西尼羅病毒胞膜蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒原理：

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抗WNV E蛋白的抗體被吸附到微量滴定板上。樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中存在的WNV E蛋白與吸附在平板上的抗體特異性結(jié)合；添加生物素標(biāo)記的抗WNV E蛋白抗體，與捕獲的抗原WNV E蛋白結(jié)合。

在孵育和洗滌步驟之后，加入HRP偶聯(lián)的鏈霉親和素，與生物素標(biāo)記的抗WNV E蛋白抗體結(jié)合。在洗滌步驟中去除未結(jié)合的鏈霉親和素，將與HRP反應(yīng)的底物溶液添加到孔中。

有色產(chǎn)物的形成與樣品中存在的WNV E蛋白的量成比例。加入酸終止反應(yīng)，并在450nm處測(cè)量吸光度。用標(biāo)準(zhǔn)品WNV E蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后確定樣品WNV E蛋白濃度。

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西尼羅病毒胞膜蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)曲：

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發(fā)表文章：

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1.Kobayashi S, Kaneko C, Kawakami R, Hasebe R, Sawa H, Yoshii K and Kariwa H (2020) Sci. Reports, 10:7168-7177.

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