PSD95抗體研究丨SYSY PSD95抗體結(jié)果圖展示
PSD95 (SAP90)
PSD95 (突觸后致密區(qū)蛋白?95)?也稱(chēng)為SAP90 (突觸關(guān)聯(lián)蛋白?90)或者由DLG4基因編碼的Disks large homolog 4 (Statthakis et al., 1997)。
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與其鄰近親屬PSD93, SAP102和SAP97，一同屬于MAGUK?蛋白超級(jí)家族，并且共享PDZ, SH3和GUK結(jié)構(gòu)域的特性(Woods and Bryant, 1993)?。
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PSD95和PSD93?是PSD的關(guān)鍵組分(Hunt et al., 1996; Kennedy, 1997)，可以形成包含數(shù)百個(gè)拷貝的多聚體支架，聚集神經(jīng)遞質(zhì)受體、離子通道和其他伴隨的信號(hào)蛋白(Dosemeci et al., 2016)。
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出于此原因，?PSD95是一個(gè)重要的，常用的標(biāo)記蛋白，用于神經(jīng)系統(tǒng)中突觸后端的特定免疫標(biāo)記，包括免疫細(xì)胞化學(xué)?(ICC)和免疫組織化學(xué)(IHC)。然而，由于多聚體的，緊湊且致密的結(jié)構(gòu)，抗體表位經(jīng)常被巨大的完整IgG抗體分子所掩蓋或由于空間位阻而難以接近。抗原修復(fù)方法或者特殊調(diào)整過(guò)的固定實(shí)驗(yàn)方案可以改善結(jié)果，但由于附加的組織處理步驟，對(duì)于其它抗體在多路復(fù)用實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用可能會(huì)是一個(gè)限制。
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艾美捷Synaptic Systems?PSD95抗體：
新的PSD95 FluoTag N3702是一個(gè)單域抗體(sdAb)，通常被稱(chēng)為納米抗體，由NanoTag Biotechnologies所研制開(kāi)發(fā)。這種重組駱駝源抗體僅由羊駝重鏈抗體的一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)組成。只有約僅僅15 kDa，這種FluoTag比傳統(tǒng)的IgG抗體分子大約小10倍。由于非常小的尺寸，即使在標(biāo)準(zhǔn)的4% PFA灌注固定和后固定組織中，這種PSD95 FluoTag也可以穩(wěn)定地訪(fǎng)問(wèn)其表位。這種組織制備方法由于確保了組織形態(tài)的J佳保存，并與大量可用的研究抗體兼容，所以通常用于振動(dòng)和冷凍切片的免疫組化染色。此外，在對(duì)人工培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞的免疫組化染色中發(fā)現(xiàn)，新引入的PSD95 FluoTag在經(jīng)PFA固定的細(xì)胞上表現(xiàn)卓越。
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它的單價(jià)結(jié)合特性，即每個(gè)FluoTag與確定數(shù)量的熒光團(tuán)分子結(jié)合，使其成為定量分析的理想試劑。為了確保大范圍的應(yīng)用符合用戶(hù)需求，艾美捷推薦Synaptic Systems?PSD95?抗體，見(jiàn)下表：
cat#?名稱(chēng)?應(yīng)用?規(guī)格
N3702-AF568-L?PSD95 sdAb, camelid, monoclonal, FluoTag-X2, AZdye 568 WB ICC IHC
N3702-AF647-L?PSD95 sdAb, camelid, monoclonal, FluoTag-X2, Alexa 647?ICC IHC
N3702-At488-L?PSD95 sdAb, camelid, monoclonal, FluoTag-X2, ATTO 488?ICC IHC
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瀏覽一下Synaptic Systems第1個(gè)PSD95 FluoTag-X2?抗體，它在標(biāo)準(zhǔn)免疫染色應(yīng)用方面例如免疫組織化學(xué)(IHC) (圖1)?和免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC) (圖?2)展現(xiàn)出了穩(wěn)固而可靠的結(jié)果。并且，在附加的抗原提取步驟中，它對(duì)經(jīng)PFA /?福爾馬林固定的，來(lái)源于大鼠和小鼠的組織和細(xì)胞沒(méi)有任何的要求。
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圖1：用FluoTag-X2?抗-PSD95磺化Cy 3?抗體(稀釋比例1 : 500,?紅色)，對(duì)自由浮動(dòng)的經(jīng)PFA固定的大鼠海馬體的振動(dòng)切片進(jìn)行間接免疫染色。細(xì)胞核由DAPI染色可見(jiàn)為藍(lán)色。
圖2：用FluoTag-X2?抗-PSD95-ATTO 542?抗體(紅色)和FluoTag-X2?抗-GFAP-At488抗體?(綠色)，對(duì)經(jīng)PFA固定的大鼠海馬體神經(jīng)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行間接免疫染色。細(xì)胞核由DAPI染色可見(jiàn)為藍(lán)色。
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艾美捷Synaptic Systems?PSD95抗體部分參考文獻(xiàn)：
Banker et al. 1974: Proteins of the postsynaptic density. PMID: 4419608
Dosemeci et al. 2016: The Postsynaptic Density: There Is More than Meets the Eye. PMID: 27594834
Hunt et al. 1996: PSD-95 is associated with the postsynaptic density and not with the presynaptic membrane at forebrain synapses. PMID: 8778289
Kennedy 1997: The postsynaptic density at glutamatergic synapses. PMID: 9185308
