抗體是由高等生命形式的免疫系統(tǒng)中的B細(xì)胞制造的蛋白質(zhì)，作為一種適應(yīng)性特征，使身體能夠處理對生物體構(gòu)成威脅的入侵外來分子?？贵w的自然功能涉及它們附著在抗原（屬于入侵的異物）上，以標(biāo)記它們被免疫系統(tǒng)破壞。

這種附著在特定分子上的天生傾向已經(jīng)確立了它們在科學(xué)研究中的用途。由于可以選擇已知會附著在某些抗原上的特異性抗體，因此研究人員可以使用抗體來識別某些物質(zhì)的存在。因此，在細(xì)胞蛋白質(zhì)功能的研究中，抗體的使用變得非常依賴。

?

科學(xué)家們已經(jīng)開發(fā)出許多利用抗體性質(zhì)來研究細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)的技術(shù)。免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、蛋白質(zhì)印跡、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)和FACS以及ELISPOT等應(yīng)用都是利用抗體的成熟方法。為了充分利用這些強(qiáng)大的研究技術(shù)，必須選擇適合特定應(yīng)用的正確抗體，因此，為您的實驗研究選擇合適的抗體是第一步也是尤為重要的一步。

?

免疫組織化學(xué)具有低至中等通量，可用于固定細(xì)胞和組織，可以產(chǎn)生細(xì)胞定位，具有高空間分辨率，通常專注于單個蛋白質(zhì)，可以一次對多種蛋白質(zhì)進(jìn)行成像，并且是定性和半定量的。

?

研究定位的另一種技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)。該技術(shù)具有低到高通量，可用于固定細(xì)胞和組織，可以產(chǎn)生亞細(xì)胞定位，可以一次對多種蛋白質(zhì)進(jìn)行成像，并且是定性和半定量的。然而，其空間分辨率受到組織結(jié)構(gòu)的限制。

?

蛋白質(zhì)印跡是研究蛋白質(zhì)濃度的合適技術(shù)。它具有低到中等通量，可用于細(xì)胞和組織裂解物，產(chǎn)生相對蛋白質(zhì)水平，可以建立分子量，亞型和翻譯后修飾，并且是半定量的。

?

ELISA是研究蛋白質(zhì)相互作用的合適技術(shù)。該方法具有中到高通量（96孔板），可用于研究血清/血漿，活或固定細(xì)胞和組織，它產(chǎn)生準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)水平，它是定量和定性的。

?

ELISA也可用于研究表達(dá)，其特征如上所述。流式細(xì)胞術(shù)和FACS是研究表達(dá)的替代技術(shù)。它具有從低到高通量（最多384孔板）。它可用于固定或活細(xì)胞，可以確定化學(xué)和物理性質(zhì)，如大小、表面標(biāo)志物的表達(dá)等。它可用于定量和分選細(xì)胞（FACS）。最后，它是一種定量方法。

?

選擇一抗

選擇一抗時，必須考慮正確的類型，單克隆或多克隆。

?

單克隆抗體僅識別抗原上的單個表位，它們產(chǎn)生的背景噪音較小，因為它們不太可能與其他蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)。此外，它們的同質(zhì)性非常高，這意味著批次之間的變異性很低。它們在與相關(guān)分子混合物中的抗原結(jié)合方面也非常有效。然而，由于它們太具體，它們不能在各種物種中工作。它們也容易受到抗原化學(xué)處理的表位丟失的影響。

?

另一方面，多克隆抗體的特征如下：它們識別任何一種抗原上的多個表位，它們具有高親和力，可以幫助放大來自低表達(dá)蛋白的信號，它們更耐受抗原的微小變化，并且它們可用于檢測來自免疫原性以外的物種的蛋白質(zhì)。然而，缺點是它們?nèi)菀壮霈F(xiàn)批次間的差異，并可能產(chǎn)生背景信號。

?

選擇二抗

所使用的方法類型將告知哪種二抗是合適的。

?

-IHC：HRP或AP偶聯(lián)、片段、生物素化（親和素/鏈霉親和素與酶或熒光染料偶聯(lián)）、熒光染料（如AlexaFluor?、Cy染料、FITC?和PE）以及預(yù)吸附。

-ICC：片段抗體，生物素化（親和素/鏈霉親和素與熒光染料偶聯(lián)），熒光染料，F(xiàn)ITC和PE，并預(yù)吸附。

-蛋白質(zhì)印跡：HRP或AP偶聯(lián)、生物素化（親和素/鏈霉親和素與酶偶聯(lián)）、熒光染料（Alexa680和Alexa790）、輕鏈特異性抗體VeriBlotforIP。

-ELISA和ELISPOT：HRP或AP偶聯(lián)，生物素化（親和素/鏈霉親和素與酶偶聯(lián)），單克?。ㄌ貏e是亞型特異性抗體，如抗IgG1）

-流式細(xì)胞術(shù)和FACS：熒光染料，Cy染料、FITC?和PE、生物素化（親和素/鏈霉親和素與熒光染料偶聯(lián)）、單克隆、F（ab'）2片段和偶聯(lián)一抗，可最大限度地提高時間效率。

?

普健生物具有完善的基礎(chǔ)檢測實驗服務(wù)平臺，擁有三大技術(shù)服務(wù)平臺：分子生物學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)，免疫學(xué)。分子生物學(xué)可以提供載體構(gòu)建，熒光定量PCR檢測，雙熒光素酶檢測等技術(shù)服務(wù)。細(xì)胞生物學(xué)可以細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染，CCK8，MTT，細(xì)胞劃痕，transwell，平板克隆，流式凋亡/周期等檢測。免疫學(xué)可以提供包括Westernblot，免疫熒光，免疫組化，Co-IP等檢測。

?