Indo-1,一種細(xì)胞生物學(xué)中常用的鈣離子熒光探針
2023-08-01 16:08 作者:bili_96594969043 | 我要投稿
Indo-1的簡(jiǎn)介
Indo-1是一種細(xì)胞生物學(xué)中常用的鈣離子熒光探針,與Fura-2(目前使用最廣泛的比率法測(cè)定的鈣熒光指示劑)相比,Indo-1能特異性地結(jié)合鈣離子,同時(shí)可發(fā)出熒光,結(jié)合鈣離子后的最大發(fā)射波長(zhǎng)從結(jié)合前的475 nm向400 nm(鈣離子飽和時(shí))偏移,該信號(hào)變化可被流式細(xì)胞儀較好的捕捉:在氬離子激光器的351-364nm光譜范圍內(nèi)單一波長(zhǎng)激發(fā)該探針,在400 nm和475 nm的波長(zhǎng)處分別檢測(cè)結(jié)合鈣離子和未結(jié)合鈣離子的熒光信號(hào),通過二者熒光強(qiáng)度的比率測(cè)定鈣離子濃度。
由于Indo-1是極性大的酸性化合物,無法進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),為此在其負(fù)性基團(tuán)上結(jié)合乙酰氧甲酯,使其成為Indo-1/AM,該變化既增加了酯溶性又消除了負(fù)電荷,極大的提高了細(xì)胞滲透性。在細(xì)胞內(nèi),Indo-1/AM被酯酶水解成Indo-1后可與胞漿游離的鈣離子可逆性結(jié)合。
Indo-1的熒光圖譜
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