Sulfo-CY3 NHS ester追蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位與遷移
星戈瑞熒光標(biāo)記
Sulfo-CY3 NHS ester作為熒光標(biāo)記試劑,可以用于追蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位和遷移,從而揭示蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的功能和調(diào)控機制。以下是使用Sulfo-CY3 NHS ester追蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)定位與遷移的一般步驟:
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1. 蛋白質(zhì)標(biāo)記:首先,將目標(biāo)蛋白質(zhì)與Sulfo-CY3 NHS ester進行共偶聯(lián)反應(yīng),使其發(fā)生熒光標(biāo)記。這樣,目標(biāo)蛋白質(zhì)就被標(biāo)記上了Sulfo-CY3熒光標(biāo)簽。
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2. 細(xì)胞滲透:標(biāo)記后的蛋白質(zhì)需要被引入到活體細(xì)胞內(nèi)。通常,標(biāo)記后的蛋白質(zhì)具有足夠的親和性和滲透性,能夠自行進入細(xì)胞內(nèi),或通過適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)染或細(xì)胞穿孔技術(shù)將其導(dǎo)入細(xì)胞。
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3. 觀察和成像:在標(biāo)記后的活體細(xì)胞內(nèi),利用熒光顯微鏡等成像技術(shù)觀察和成像。Sulfo-CY3 NHS ester標(biāo)記的蛋白質(zhì)會發(fā)出熒光信號,可以直接觀察蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位和分布。
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4. 時間序列觀察:通過不同時間點的成像,可以得到蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的時間序列動態(tài)變化信息。這樣可以觀察蛋白質(zhì)的定位、遷移以及在不同細(xì)胞區(qū)域的動態(tài)變化。
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5. 共定位分析:如果需要,可以同時使用其他熒光標(biāo)記的蛋白質(zhì)或細(xì)胞器標(biāo)記來進行共定位分析,從而了解蛋白質(zhì)與細(xì)胞器的相互作用和定位關(guān)系。
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通過以上步驟,可以利用Sulfo-CY3 NHS ester追蹤蛋白質(zhì)在活體細(xì)胞內(nèi)的定位和遷移,進而了解蛋白質(zhì)的功能和調(diào)控機制。這種技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)功能研究、細(xì)胞信號傳導(dǎo)等領(lǐng)域中有著應(yīng)用。
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FITC-CM-Dextran
Avidin-ICG
Avidin-RB
Avidin-FITC
FITC-Dextran
Sulfo-CY5.5 NHS ester
CY7 NHS ester
CY5 NHS ester
CY5-Dextran
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